Ravitseva agari
- 4157
- 503
- Alonzo Kirlin
Mikä on ravitseva agar?
Hän ravitseva agari Se on ei -selektiivinen ja ei -differentiaalinen kiinteä viljelyalusta. Tässä ympäristössä kaikenlaiset ei -tarvittavat bakteerit kasvavat ravitsemuksellisesta näkökulmasta.
Se on yksinkertainen keino, ja nimestään huolimatta se sisältää alhaisemman ravinnon.
Sen hyödyllisyys laboratoriossa on hyvin monipuolinen. Pääasiassa se palvelee lajien subkulttutiivista, kantojen ylläpitämistä, pesäkkeitä laskemassa veren valmistelua varten muun muassa.
Myös sen kevyen beige -värin vuoksi joidenkin bakteerikannojen tuottamien pigmenttien tuotanto, kuten vihertävän pigmentti Pseudomonas aeruginosa, Tiilipunainen pigmentti Serratia Marcescens Huoneenlämpötilassa kultainen keltainen pigmentti Staphylococcus aureus, muiden joukossa.
Lisäksi se on yksi markkinoiden taloudellisimmista kulttuurimediaista.
Perusta
Kuten edellä mainittiin, se on hyvin yksinkertainen keino, joka perustuu bakteerien kasvun ravitsemuksellisten aineiden tarjoamiseen ilman rajoituksia ja ilman monimutkaisia reaktioita tulkittavaksi.
Koska väliaine on läpikuultava, on ihanteellista laskea pesäkkeitä syvyyden istutetulla menetelmällä.
Sävellys
Se koostuu pääasiassa liha- tai hiivauutetta, peptonasista tai haiman gelatiinista, agar-gaugarista, natriumkloridista ja tislattua vettä.
Lihan tai hiivojen ja peptonien uutte edustaa hiili- ja välttämättömien mineraalien lähteitä (typpi, fosfori ja rikki), joita bakteerit käyttävät energia- ja kasvutekijöiden lähteenä.
Samoin agar -agar on kaikkien kiinteiden viljelyväliaineiden perusta, korvaaen gelatiinin, joka oli ensimmäinen Robert Kochin käyttämä emäsyhdiste, joka antoi kiinteän konsistenssin sen väliaineelle.
Voi palvella sinua: Falklandin saarten kasvisto ja eläimistö: Erinomainen lajiAgar on polysakkaridi, joka koostuu galaktoosista, galaktomananosta, agarosista ja agarpectinista. Cumage 40 ° C: ssa ja sulaa lähellä 100 ° C.
Natriumkloridi puolestaan tarjoaa bakteerien kehitykseen tarvittavan ympäristön.
Lopuksi vedellä on hydratoida ja liuottaa lyofilisoituja yhdisteitä. Neutraaliin pH: han säädetty tislattua vettä tulisi käyttää. Nykyistä vettä ei tule käyttää, koska se sisältää kalsiumia ja magnesiumia, jotka voivat reagoida ympäristön fosfaattien kanssa ja muodostaa liukenemattomat suolat.
Valmistautuminen
Litrasta ravitsevaa agaria sinun on painoi 31 g dehydratoitua väliainetta. Se asetetaan fixolaan ja liukenee litraan tislattua vettä. Viiden minuutin lepoajan jälkeen lämmitä lämmönlähde ja sekoita jatkuvasti, kunnes se kiehuu 1 tai 2 minuuttia.
Sitten Fixola asetetaan autoklaavaan ja steriloidaan 121 ° C: ssa 20 minuutin ajan. Huipentunut aika, se poistetaan autoklaavesta ja tarjoillaan steriilissä petrissä.
Jos Petri -levyt ovat kertakäyttöisiä (muovia), väliaine on jaettava, kun agarin lämpötila on likimääräinen 50 ° C, jotta ne estäisivät muodonmuutosta liiallista lämpöä.
Anna kiinteyttää ja säästää käänteisen pidikkeen ja jääkaapissa jääkaapissa 2-8 ° C: ssa, kunnes käytät.
Levyjä on karhennettava ennen istutusta. Ravitsevia agarilevyjä ei tule käyttää, jos ne ovat saastuneita tai kuivuneet.
Valmistettu väliaine pH on säädettävä arvoon 7,3 ± 0,2.
Sovellukset
Se on yksinkertaisin viljelyalusta, jota käytetään mikrobiologian laboratoriossa. Sen formulaatio on erinomainen ei -tarvittavien bakteerien kasvulle.
Sen pääkäyttö on seuraava:
- Veriagarin valmistuksen perusta: Joskus sitä käytetään veren valmistelun perustana, se ei kuitenkaan ole yleisimmin käytetty emäs.
- Stimuloi itiöiden itiöiden itiöitä: On erityisen hyödyllistä stimuloida itiöiden muotoilun bakteerien, kuten Bacillus sp. Tätä varten genren kanta kylvetään Basilli ja inkuboi 24 tuntia 37 ° C: ssa aerobioosissa. Kun pesäkkeet on kasvatettu, levylle altistetaan lämpötilajännitys, toisin sanoen liesin lämpötila 44 ° C: ssa nousee ja jätetään 24 tuntia enemmän tai se johdetaan jääkaappiin 24 tunnin ajan. Ajan lopussa ne pidennetään sadosta ja värjäytyvät grammavärjäyksellä tai värjäämällä Shaeffer-fulton-itiöitä. He tarkkailevat bakteereja endosporeiden (itiöiden sisällä Bacilluksen sisällä) ja Exovoren kanssa (itiöt Bacilluksesta).
- Kantojen ylläpito: Jotkut tutkimukset tai tiedekuntien tukilaboratoriot vaativat kliinisesti tärkeitä elinkelpoisia bakteereja mahdollisimman pitkään bakteeripankkien (Bacterooteca) käyttöä tutkimustyöhön tai opetuskäytäntöjen valmisteluun, joissa opiskelijat oppivat manipuloimaan ja tunnistamaan nämä mikro -organismit. Ravitsevaa agaria, samoin kuin Cerebro -sydämen infuusiota, voidaan käyttää tähän tarkoitukseen. Agar on valmistettu, kaadetaan putkiin, joissa on baquelite -kansi ja nojautuu pohjaan, niin että agari jähmettyy tacon muodostamisen pohjaan ja kehon pinnalle (huilun piikki). Jokainen putki on merkitty asettamalla kylvettyjen ja päivämäärän nimeä. Jokainen bakteerit kylvetään kehykseen ja sitä inkubidaan 24 tuntia, kun pesäkkeet ovat kasvaneet. Putket varastoidaan huoneenlämpötilassa. Bacterooteca on uusittava 1-3 kuukaudesta ympäristön saastumisen ja kuivumisen välttämiseksi sekä bakteerien kuolema. Vain ei -tarvittavat bakteerit voidaan ylläpitää tällä tavalla.
- Pesäkkeet: Vaikka pesäkkeille on olemassa erikoistuneita keinoja, kuten standardimääritys, ravitsevaa agaria voidaan käyttää tähän tarkoitukseen joko Drigalski -lastalla tai syvyyden pintaan. Siksi se on erittäin hyödyllinen ruoan ja veden mikrobiologisessa analyysissä.
- Diagnostisten testien suorittaminen-. Myös vaaleanvärisensä vuoksi on osoitettu suorittavan oksidaasitestejä suoraan kylvetyn alueen alueella ilman häiriöitä.
- Virkistysveden mesofiilinen aerobinen toipuminen (rannat): 10% merivedellä valmistettu ravintoaine -agar on hyödyllinen mesofiilisten lentokoneiden arvioinnissa rannoilla. Tällä tavoin voit nähdä todellisen pilaantumisen tason, joka vesillä on näissä mikro -organismeissa. Tämä on selitettävää johtuen bakteerien äkillisestä muutoksesta siirtyessään hypersaloidusta ympäristöstä matalaan suolaympäristöön, joten mikro -organismit tulevat letargiatilaan, jossa ne ovat elinkelpoisia, mutta ei viljelykelpoisia.
Viitteet
- Forbes, b., Sahm, D., Weissfeld, a. Bailey & Scott -mikrobiologinen diagnoosi. Pan -American toimitus.-Lla.
- Koneman, E., S, s., Janda, W., Schreckenberger, P., WINN, W. Mikrobiologinen diagnoosi. Pan -American toimitus.-Lla.