Kirkkaanvihreä agar, perusta, valmistelu, käyttö

Hän Kirkkaanvihreä agar Se on vankka viljelyalusta, jolla on korkea selektiivisyys. Sitä käytetään yksinomaan Salmonella -suvun kantojen eristämiseen; On kuitenkin joitain poikkeuksia, kuten Typhi- ja Parathyphi -lajit, jotka eivät kasva tässä väliaineessa.

Salmonella -genren etsiminen on usein uloste-, vesi- tai ruoanäytteissä. Tässä mielessä tämä väline voi olla erittäin hyödyllinen. Kauffmann muutti tämän agarin vuonna 1925 Kristensenin, Lesterin ja Jurgensin kanssa.

Se koostuu moninpeleistä pilkotusta eläinkudoksen peptisesta ja digreatisista kaseiinista, sisältää myös hiivauutetta, natriumkloridia, laktoosia, sakkaroosia, fenolipunaista, kirkkaan vihreää ja kahvaa.

Sille on ominaista, että se on melko inhottava väliaine useimmille bakteereille, suosimalla salmonellan kasvua, mutta jotkut koliformit kykenevät toimimaan siinä, kehittyvät heikosti.

On tärkeää korostaa, että tässä väliaineessa Shigella -genre ei kasva eikä kumpikaan Salmonella typhimurium, ei kumpikaan Salmonella paratyphi. Siksi, jos haluat eristää nämä mikro -organismit, tulisi käyttää muita väliaineita, kuten XLD -agar, muun muassa.

Perusta

Kirkkaanvihreä agar

Jokainen väliaineesta muodostava komponentti täyttää tietyn toiminnon, joka määrittää agarin ominaisuudet ja ominaisuudet.

Pluripeptonit ja hiivauute ovat ravintoaineiden lähde, jossa mikro -organismit vievät typpeä ja mineraaleja, jotka ovat välttämättömiä niiden kehitykseen. Laktoosi ja sakkaroosi ovat energialähteitä mikro -organismeille, jotka kykenevät käymään niitä.

Kirkkaanvihreä on estäjä aine, joka estää Gram -positiivisten bakteerien ja suuren määrän gram -negatiivisia mikro -organismeja.

Voi palvella sinua: troponiini: Ominaisuudet, rakenne, toiminnot ja testit

Natriumkloridi tarjoaa ympäristölle osmoottisen stabiilisuuden. Vaikka punainen fenoli on pH -indikaattori, samanvärinen VIRA havaitaan happojen tuotanto hiilihydraattisista käymisistä.

Laktoosin ja sakkaroosin ei -fermentymättömät pesäkkeet kasvavat tässä valkoisen tai läpinäkyvän valkoisen värin väliaineessa, punaisella taustalla. Esimerkiksi Salmonella -suvun bakteerit.

Vaikka laktoosi- tai sakkaroosin käymisbakteerit, jotka kykenevät kasvamaan tässä väliaineessa, ne kehittyvät keltaisen tai kellertävän keltaisen värin, vihertävällä keltaisella taustalla. Esimerkiksi, Escherichia coli ja klebsiella pneumoniae.

Kirkkaanvihreät agar -variantit (BGA)

Kirkkaanvihreän agarin muunnoksia on myös muita; Kirkkaanvihreä vihreä girvobiocin -apar (NBG) ja loistava ahneus kasvattivat glicerol avocin -laktoosia (NBGL).

Kirkkaanvihreä novobiocin -agar -glukoosi (NBG)

Se sisältää soijapapujen maatalouden, Ferric Ammonium Citro.

Sitä käytetään salmonellapesäkkeiden eristämiseen ulostenäytteistä.

Tässä tapauksessa kirkkaanvihreä ja novobiocin ovat estäviä aineita, jotka estävät Gram -positiivisten bakteerien ja joidenkin gram -negatiivisten mikro -organismien kasvun.

Natriumtriosulfaatti on rikkilähde ja rautasitraatti on rautalähde, joka on välttämätöntä hydyntuotannon paljastamiseksi ferrisulfidin mustan sakan muodostumisen kautta.

Glukoosi on käyttävä hiilihydraatti ja fenolipunainen on pH -indikaattori.

Tässä väliaineessa Salmonella -pesäkkeet kehittyvät suureksi mustalla keskuksella, jota ympäröi punertavan halo ja jota seuraa selkeä näkyvä alue. Joitain kantoja Citrobacter freundii tuottaa identtisiä pesäkkeitä Salmonella.

Se voi palvella sinua: Durangon kasvisto ja eläimistö: edustavat lajit

Brilliant Glicerol Green Green Avobiocin -laktoosiglyseroli (NBGL)

Tämä väliaine sisältää soijapapujen maatalouden, rauta -ammoniumsitraatin, natriumtriosulfaatin, laktoosin, glyserolin, kirkkaan vihreän, novobiosiinin ja tislattua vettä.

Ero tässä väliaineessa edellisen kanssa.

Elatusainetta käytetään myös salmonellalajien eristämiseen, pesäkkeistä kehittyy mustia, tuottamalla rikkivety.

Vain pesäkkeet, jotka eivät tuota happoa glyserolista tai laktoosista, saavuttavat H: n₂Riittävä, koska pH häiritsee H: n muodostumista₂S. Tämä johtaa värittömiin pesäkkeihin useimmille Proteus- ja Cytobacter -lajeille.

Valmistautuminen

-Punnitse 58 grammaa dehydratoitua elatusainetta, joka on saatu kaupallisesti. Lisää se litraan kaivattua vettä. Sekoita, anna seistä muutama minuutti ja lähetä valmistus lämmönlähteelle, kunnes se liukenee kokonaan.

-Autoklaavi 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan, älä ylitä sterilointiaikaa.

-Anna seistä ja tarjoile vielä kuumana Petri -steriileillä levyillä. Lopullisen pH: n on oltava 6,9 ± 0,2.

-Anna jähmettyä ja säästää jääkaapissa, kunnes käytä. Ennen levyjen kylvää heidän on otettava huoneenlämpötila.

-Jauhe on vihreä ja valmistettu ottaa appelsiiniruskean tai punertavan vihertävän värin pH: sta ja kaupallisesta talosta riippuen. Erittäin ruskea väri osoittaa, että agar ylikuumenee.

-Kun agaria ei suositella, ei ole suositeltavaa rakentaa uudelleen, koska väliaine huononee.

Käyttää/sovelluksia

Tätä väliainetta käytetään muun muassa Salmonella -näytteiden kantojen etsimiseen Salmonella -näytteitä.

Voi palvella sinua: fosfatidilseriini: rakenne, synteesi, toiminnot, sijainti

Koska on melko turhaa keinoa, on suositeltavaa kylvää runsas siirto, jos suoraa näytettä käytetään. Muutoin näytteiden rikastumista ja rikastusta tulisi tehdä ennen kylvää tässä väliaineessa.

Koska jotkut salmonellakannat ovat estettyjä tai kasvavat vaikeuksissa, on suositeltavaa seurata tätä väliainetta muiden Salmonella -aikojen kanssa.

Jokaiselle tyypillisellä salmonella -ominaisuudella varustetulla pesäkkeellä on suoritettava biokemialliset testit lopullista tunnistamista varten.

QA

Kirkkaan vihreän agarin asianmukaisen toiminnan testaamiseksi. ATCC -kantoja voidaan käyttää niiden kehityksen tarkkailuun.

Yleisimmät laadunvalvontaan käytetyt kannat ovat: Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

Ensimmäisen 3 on annettava vaaleanpunainen tai läpinäkyvät valkoiset pesäkkeet punaisella taustalla. Salmonella, jolla on hyvä kehitys ja proteus niukun tai säännöllisen kasvun kanssa.

Klebsiellaa ja Escherichiaa varten vihertävän keltaisten pesäkkeiden odotetaan keltaisella taustalla, ja Shigella ja Staphylococcus on estettävä.

Dehydratoitu väliaine on säilytettävä huoneenlämpötilassa kuivassa paikassa, koska väliaine on erittäin hygroskooppinen.

Viitteet

1. Britannian laboratorio. Kirkkaanvihreä agar. 
2. BD -laboratorio. BD Brilliant Green Agar.