Xantoprotic Reaktion -säätiö, menettely, käyttö

Se Xantoprotic Reaktio Se on kemiallinen menettely, jota käytetään aromaattisten aminohappojen, kuten tyrosiinin ja tryptofaanin, esiintymisen tai puuttumisen määrittämiseen, jotka voivat olla vapaat tai muodostuvat liukoiset proteiinit, peptidit tai polypeptidit.

Sitä on käytetty myös myrkyllisten aineiden havaitsemiseksi veren tasolla, joka sisältää beancenic -ryhmän sen rakenteessaan. Tämä testi tunnetaan myös nimellä Becher Xantoprotic Reaktio.

Positiivinen xantoprotic Reaktiolähde: Videosta otettu: https: // YouTu.Be/gzgmbw5w4wo

Xantoprotic -reaktio käyttää konsentroitua typpihappoa, lämpöä ja neutraloivaa alkalia. Jos reaktion neutraloinnissa keltainen oranssi liuosliuos pidetään positiivisena. Havaittu väri johtuu bentseeniryhmien nitrifikaatiosta johdettujen typpiyhdisteiden muodostumisesta.

Jos joudut kvantifioimaan kokonaisproteiinien määrä, on välttämätöntä käyttää muita proteiinin määritysmenetelmiä, kuten Biuret.

Xantoprotic -reaktiota käytetään pääasiassa, kun aineita analysoidaan, jolle sen kemiallista koostumusta ei tunneta. Yleensä tämä reaktio on osa testijoukkoa, joka auttaa määrittämään tietyn aineen tai uutteen kemiallisen koostumuksen. Siksi tutkijat käyttävät sitä laajalti.

Toisaalta Becherin xantoprotic -reaktiota käytetään fenolisten ja indolisten aineiden havaitsemiseksi veressä, mikä on mahdollista ennustaa nefropatian ulkonäköä, ennen kuin muut parametrit lisääntyvät.

[TOC]

Perusta

Reaktio havaitsee periaatteessa bentseeniryhmän läsnäolon, molemmat aminohapoissa, kuten proteiineissa ja peptideissä. Typpihappo vaikuttaa sen hallussaan olevaan aminohappo -benceenirenkaaseen, muodostaen fenoliset nitrokompostoinnit.

Reaktio tarvitsee lämmön suoritettavan, yleensä muodostuu sakka, joka pilaa väliaineen, mikä tekee siitä maitomaisen. Sakka voi olla valkoinen tai keltainen. Lopuksi se vaatii alkalisointivaihetta, joka korostaa väriä. Tätä varten käytetään 40%: n tai ammoniakin natriumhydroksidia.

Reaktio tulkitaan positiiviseksi, jos tumman lämmityksen tai oranssin prosessin aikana havaitaan voimakasta keltaista väriä alkaloimalla reaktio. Havaitut aminohapot ovat pääasiassa tyrosiini ja tryptofaani.

Xantoprotic Reaktio. Lähde: http: // esteroisomeras.Blogin.com/2013/06/Proteiinien karakterisointi.HTML

Fenyylialaniinin tapauksessa, vaikka se on aromaattisia aminohappoja, tämän aminohapon bentseenisydin on vaikea niitata yksinkertaisessa reaktiossa, siksi se säteilee tai negatiivisesti tai heikosti positiivinen reaktio.

Voi palvella sinua: napaisuus (kemia): Mikä on, määritelmä, esimerkit

Yleensä ksantoproottinen testi voidaan täydentää Hopkins-Cole-testillä, jonka tarkoituksena on erityisesti tunnistaa triptofaani. Jos ksantoproottinen testi on positiivinen ja Hopkins-Cole on negatiivinen, tryptofaanin läsnäolo hylätään kyseisessä liuoksessa, mikä johtaa pääasiassa tyrosiinin läsnäoloon. Samoin sitä voidaan täydentää myös Millonin reaktiolla tyrosiinin havaitsemiseksi muun muassa.

Tätä reaktiota voidaan käyttää myös verinäytteissä, plasmassa tai muuttumattomissa seerumissa uremian tai munuaisten vajaatoiminnan diagnosoimiseksi. Tällöin haetaan suoliston mätää tuotettujen myrkyllisten aineiden havaitsemista.

Näillä aineilla on bentseeniryhmä, ja siksi ne antavat positiivisen xantoprotic -reaktion, vaikka reaktiiviset aineet eivät ole aminohappoa eikä proteiinia.

Menettely

- Ksantoproottinen reaktio aminohappojen havaitsemiseksi aromaattisten ryhmien kanssa

Aseta 1 ml ongelmanäyte puhtaaseen ja kuivaan koeputkeen.

-Lisää 0,5 ml väkevää typpihappoa.

-Inkuboi seosta 70 ° C: n kylpyhuoneessa 2 minuutin ajan. Valmista aiemmin Maria -kylpy edellä mainitussa lämpötilassa.

-Kun otat putken Maria Bathista, on mahdollista havaita, että liuoksesta on tullut maitomainen ja ottanut jonkin verran kellertävää valkoista väriä.

-Liuos jäähdytetään pudottamalla kylmä vesi putken pohjaan.

-Valmistuksen väitetään hitaasti (pudota pudotuksella) 40% natriumhydroksidiliuoksella, kunnes värisokki on.

-Jos testi on positiivinen, tumman oranssi rengas muodostuu nestemäisestä rajapinnasta.

-Jos reaktio on negatiivinen, värinmuodostumista ei tule olemaan.

- Ksantoproottinen reaktio fenolisten ja indolisten aineiden havaitsemiseksi veressä

-Annostuu 5 cm3 trikloorietikkahappoa 20%: lla yli 5 cm3: n laskimoveren, plasman tai seerumin, jälkimmäinen on eniten osoitettu. Sekoita hyvin ja suodata.

Voi palvella sinua: typpihappo (HNO3)

-2 cm3 suodatusta otetaan ja sekoitetaan 0,5 cm3 typpihappoa. Sitten se lämmitetään kiehumiseen, tälle putki asetetaan suoraan vaalean liekkiin 30 sekunnin ajan. Jäähtyy vedellä ja lisää 1,5 natriumkloridia 33%: lla.

Se tulkitaan seuraavasti:

-Negatiivinen tulos: kellertävä väri.

-Positiivinen tulos (+) sitruunankeltainen.

-(++) kullankeltainen.

-(+++) tummankeltainen ruskeaksi

Sitä voidaan tulkita myös käyttämällä auenriethin referenssikolorimetristä asteikkoa, joka muodostuu erilaisilla kalium -pitoisuuksilla bicromato. Tämä valmistetaan laimennoksissa 10: stä 10: stä 0,03874%: n äiti -liuoksesta. Jokainen putki edustaa prosenttiosuutta.

Tulkinta -asteikot

On olemassa kaksi tulkinta -asteikkoa, joita kutsutaan muinaisiksi ja moderneiksi. Normaalit ovat:

Vanha taulukko: välillä 75 - 85%

Nykyaikainen taulukko: välillä 15-25%

Jos ongelmaputken väri on kahden kuvion putken keskellä, keskiarvo tehdään molempien toimenpiteiden välillä.

Kaliumdikromaattikuvioliuos valmistetaan seuraavasti: 7 mitataan.9 ml kaliumdikromaattia 10 N: ssä ja huuhtelee jopa 100 ml: iin Aggorado -pallossa. Laimennoksille sitä noudatetaan, kuten se on esitetty Autenriethin kolorimetrisessa taulukossa.

Autenriethin kolorimetrinen taulukko. Lähde: Vásquez a. Xantoprotic Reaktio. Espanjan kliininen aikakauslehti. 1949; 35 (5): 326-327. Saatavana: Elsevier

Käyttää

Xantoprotic -reaktion käyttö on osa biokemiallisia testejä, jotka auttavat tuntemattoman aineen kemiallisen koostumuksen tuntemiseen. Tämä testi myötävaikuttaa kemialliseen analyysiin bentseeniryhmiä sisältävien proteiinien havaitseminen niiden rakenteessaan.

Tutkijat käyttävät tätä reaktiota laajasti erilaisissa ainetutkimuksissa.

Tässä mielessä Vásquez-Jorge ja yhteistyökumppanit käyttivät tätä ja muita reaktioita tutkimaan mangrove-otettujen nesteiden proteiinipitoisuutta (Crassostrea Rhizophorae).

Samoin Rojas ja yhteistyökumppanit (2009) käyttivät sarjaa testejä, joista on ksantoproottinen reaktio, Glycomacropéptides -analysoimiseksi Lactosueros de Ricotta -sarjoissa.

Toisaalta Becherin xantoprotic -reaktio modifioidaan Volhardilla käytettäväksi muihin tarkoituksiin. Tässä tapauksessa fenolisten ja indolisten aineiden havaitsemiseksi, joita voidaan nostaa paljon aikaisemmin (viikkoja tai kuukausia), että urean ja jäännöstypen tasot veressä nousevat.

Se voi palvella sinua: cerio: rakenne, ominaisuudet, hankkiminen, käyttö

Nämä myrkylliset jätteet muodostetaan ruoan suoliston mätää.

Nämä aineet kerääntyvät vereen, kun niitä ei ole eliminoida asianmukaisesti, siksi positiivinen xantoprotic testi voi ennustaa itse munuaisten vajaatoiminnan nopean muodostumisen tai uremian tila.

Värin voimakkuuden mukaan voit määrittää kuinka edistyksellinen se on. Tässä tapauksessa testi on kvantitatiivinen.

Terveillä ihmisillä tämä testi antaa lievän keltaisen värin, joka vastaa normaalia tryptofaanitasoa ja tyrosiinia, joka voi olla veressä.

Munuaispotilailla ksantoproottinen reaktio antaa voimakkaasti positiivisesti seuraavien aineiden läsnäolon vuoksi: fenoli, indoli, parasresoli, aromaattiset hapot, muun muassa.

Varotoimenpiteet

Tämän testin on suoritettava koulutettujen ammattilaisten toimesta. Kaikkia bioturvallisuusstandardeja tulisi harkita, koska käytetyt reagenssit ovat happoja ja syövyttäviä emäksiä.

Jos vahingossa muutama tippa typpihappoa iholle tai kynsille putoaa, ne muuttuvat keltaisiksi, koska molemmat rakenteet sisältävät proteiineja. Lisäksi iholla ja limakalvolla se aiheuttaa vakavia palovammoja.

Jos kosketus ihoon tapahtuu, seuraavan protokollan on oltava pestä alue heti saippualla ja vedellä noin 20 minuutin ajan.

Jos roiskutat silmiä, sinun on pestävä runsaasti makeaa vettä yrittämällä pitää silmäsi auki.

Viitteet

1. "Xantoproteica -reaktio" Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 2. syyskuuta 2019, 17:49 UTC. 21. lokakuuta 2019, 20:31 Wikipedia.org/
2. Vásquez-Jorge ja, Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge ja. Mangrove -osoituksen nesteuutteiden fysikaalis -kemiallinen karakterisointi ja proteiinipitoisuus (Crassostrea Rhizophorae-A. Kuuban kemia, 2014; 26 (1): 66-74. Saatavana Redalycissä.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. GMP: n eristäminen ja suoritus. Tiedemies. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. Saatavana osoitteessa: ve.Scielo.
4. Vásquez a. Xantoprotic Reaktio. Espanjan kliininen aikakauslehti. 1949; 35 (5): 326-327. Saatavana: Elsevier
5. Gálvez i, gárate tai. Becher- ja Andrewes -reaktiot virtsaleikkauksessa. Espanjan sairaalan urologiapalvelu. Argentiinan urologialehti 395-404