Baird Parker Agar Mikä on, perusta, valmistelu, käyttö

Hän Baird Parker Agar tai munankeltuaisen agar on kiinteä, selektiivinen ja differentiaaliviljelmäväliaine. Se luotiin vuonna 1962 positiivisen koagulaasin stafylokokkien havaitsemiseen ja määrään (lukumäärä (Staphylococcus aureus-A.

Se koostuu haiman kaseiinin hydrolysoidusta, lihauutetta, hiivauutteesta, litiumkloridista, glysiinistä, natriumpyruvaatista, kaliumjäluriitista, kahvasta ja munankeltuaisen emulsiosta.

Staphylococcus aureuksen tyypilliset pesäkkeet Baird Parkerin ikääntyessä. Lähde: Daizy John [CC 4: llä.0 (https: // creativecommons.Org/lisenssit/by/4.0)]

Baird Parker Agar perustuu S. aureus Teluriton vähentämiseksi ja lesiithinaasia tuottamiseksi. Molemmat ominaisuudet luovat pesäkkeen, jolla on erityiset ominaisuudet tälle lajille. Siksi se tarjoaa suuren tehokkuuden tämän mikro -organismin havaitsemisessa.

Tyypilliset siirtokunnat S. aureus Ne ovat mustia tai tummanharmaisia, väritön reuna ja selkeä halo, joka ympäröi niitä, eroavat muista mikro -organismeista. Tätä patogeeniä löytyy kliinisistä näytteistä, vesistä, kosmetiikasta ja raa'asta tai keitetystä ruuasta.

Sen diagnoosi tai havaitseminen on erittäin tärkeää sen tuottamien patologioiden, kuten ruokamyrkytyksen, iho -oireyhtymän, myrkyllisen sokin oireyhtymän, paiseiden, meningiitin, septikemian, endokardiittien vuoksi, johtuen muun muassa.

Perusta

Ravitsemusvoima

Kaseiini -haiman hydrolysoitu, lihauute ja hiivauute ovat ravintoaineiden, vitamiinien ja mineraalien lähteitä, joita tarvitaan mikrobien yleiseen kehitykseen, kun taas pyruvaatti ja glysiini ovat yhdisteitä, jotka suosivat erityistä kasvua Staphylococcus aureus.

Valikoiva

Baird Parker -agar on selektiivinen, koska se sisältää aineita, jotka estävät mukana olevan kasvistoa S. aureus. Estävät yhdisteet ovat litiumkloridi- ja kalium -telluriitti.

Ero

Tämä väline mahdollistaa erottamisen S. aureus Muut negatiiviset koagulaasista stafylokokit. S. aureus Sillä on kyky vähentää teluriittiä mustaan ​​metalliseen teluroon, muodostaen mustat tai tumman harmaat pesäkkeet.

Samoin munankeltuainen tarjoaa substraatit osoittamaan lekinaasi- ja lipasa -entsyymin läsnäolon. S. aureus Se on positiivinen lesiitinä ja siksi havaitaan selkeä halo pesäkkeen ympärillä, mikä osoittaa, että lesitiini hydrolysoitiin.

Voi palvella sinua: Gill -hengitys: miten se tehdään ja esimerkkejä

Tässä mielessä ulkonäkö tässä mustassa tai kirkkaan mustassa tai harmaassa -matopaksossa S. aureus. 

Jos sademäärävyöhyke muodostuu, on osoitus siitä, että lipaasilla on aktiivisuutta. Joitain kantoja S. aureus Ne ovat positiivisia ja muita negatiivisia lipaasia.

Siinä tapauksessa, että S. aureus Ole positiivinen lipaasi, läpinäkymätön alue havaitaan mustan tai tummanharmaan pesäkkeen ympärillä, ja sitten kirkas halo lesitiitin vaikutuksesta.

Muiden bakteerien pesäkkeet S. aureus Pystyy kasvamaan tässä väliaineessa, ne kehittävät värittömiä tai ruskeita pesäkkeitä ilman haloa ympärillä.

Voit myös tarkkailla epätyypillisiä mustia pesäkkeitä väritöntä reunaa tai ilman, mutta ilman kevyttä haloa. Näitä pesäkkeitä ei pidä ottaa huomioon, ne eivät vastaa S. aureus.

Valmistautuminen

Munankeltuainen emulsio

Viileä kanan muna otetaan, vaelsi hyvin ja sijoitettiin 2-3 tuntia 70% alkoholiin. Sitten muna avaa aseptisesti ja varovasti keltuaisen kirkkaan erottelun. Myöhemmin otetaan 50 ml keltuaista ja sekoitetaan 50 ml: n kanssa steriilistä fysiologista liuosta.

1% P/V -kaliumkala

Jotkut kaupalliset talot myyvät 1% runoilijan teluroa valmiina käytettäväksi. Se lisätään väliaineeseen ennen kuin keinot jähmettyy.

Tämän liuoksen valmistamiseksi laboratoriossa, 1.0 g gr kalium -telluriittia ja liukenee veteen. Myöhemmin veden määrä on valmis, kunnes se saavuttaa 100 ml. Liuos on steriloitava suodatusmenetelmällä.

Viljelysalusta

Punnitse 60 g dehydratoitua väliainetta ja liukene 940 ml: aan tislattua vettä. Jätä lepo -seos noin 10-10 minuutiksi.

Se voi palvella sinua: Spesifiset suhteet: Tyypit ja esimerkit

Levitä lämpöä ympäristön sekoittamiseen usein liukenemisprosessin parantamiseksi. Anna kiehua minuutin ajan. Sterilice autoklaavessa 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan.

Anna seistä, kunnes se saavuttaa lämpötilan 45 ° C ja lisää 50 ml munankeltuaisen emulsiota ja 10 ml 1 -prosenttista teluriittia. Sekoita hyvin ja tarjoile välillä 15-20 ml Petri -steriileillä levyillä.

Anna kiinteyttää, tilata käännetyssä lautasissa ja säästä jääkaapissa, kunnes käyttö.

Valmistetun väliaineen lopullisen pH: n on oltava 6,8 ± 0,2.

Ennen näytteen kylvää, sinun tulee odottaa levyn ottamista ympäristön lämpötilaan. Kylvä plakkeja kiinnittyvästä tai pinnasta, joka on istutettu Drigalski -lastalla.

Dehydratoidun väliaineen väri paahdetaan ja valmistetun väliaineen väri on kevyt keltainen.

Käyttää

Kliiniset näytteet

Kliiniset näytteet kylvetään suoraan purkamalla osan materiaalista levyn toisessa päässä, ja sieltä ne erottuivat uupumuksen takia. Inkuboi 24-48 tuntia 35-37 ° C: ssa.

Elintarvikkeet

Punnitse 10 g elintarvikkeidenäytettä ja homogenisoi 90 ml: ssa 0,1%Peptonada -vettä, sieltä ne valmistelevat laimennoksia tarvittaessa. Inokuloi plakkeja kolmena kappaleena 0,3 ml: lla valmistettuja liuoksia ja kylvä pinnalla Drigalski -lastalla. Se on inkuba 24-48 tuntia 35-37 ° C: ssa.

Tämän menetelmän avulla voit laskea tyypilliset saadut pesäkkeet ja on ihanteellinen S. aureus Yli 10 UFC/gr/ml näytettä kohti.

Jos epäillään, että määrä S. aureus Se on pieni tai siellä on paljon mukana olevaa kasvistoa, sitä ehdotetaan. Tämä suosii S. aureus ja estää mukana olevan kasvistoa. Tuft -putket kylvetään Baird Parker Agarissa.

Voi palvella sinua: Kuinka elävät organismit ympäristöstämme erottuvat?

Vesinäytteet

Tyhjiö- ja steriloidussa suodatusjärjestelmässä 100 ml tutkittavaa vettä suodatetaan ja sitten 0,4 mikronit mikrohuokoinen kalvo poistetaan steriilillä kiinnittimellä ja asetetaan Baird Parker -levylle. Se on inkuba 24-48 tuntia 35-37 ° C: ssa. Tämän tekniikan avulla tyypilliset siirtokunnat voivat luottaa S. aureus.

QA

Baird Parker -agarin laadun arvioimiseksi voidaan käyttää tunnettuja kantoja, kuten Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Kantojen tapauksessa S. aureus ATCC: n tiedetään vähentävän teluriittia, ja ne ovat positiivisia lipaasi- ja lesitiitinäisiä. Siksi on oltava tyydyttävä kehitys ja kasvatettava kuperia pesäkkeitä mustalla keskustalla ja väritön reuna, läpinäkymätön halo ja toinen ulkoinen halo selkeästi.

Puolestaan, S. epidermidis Tällä väliaineella odotetaan huonoa kehitystä, ja harmaat siirtokunnat kiinnittävät mustaan, ilman selkeää haloa.

Puolesta JA. koli ja P. Mirabilis Sen odotetaan olevan täysin tai osittain estetty. Jos kasvatetaan ruskeita pesäkkeitä ilman läpinäkymätöntä vyöhykettä tai kirkasta haloa.

suositukset

-Elatusainetta ei tule lämmittää sen jälkeen, kun lisäät telurin ja munankeltuaisen.

-Munankeltuaisen emulsio ja sen aggregaatti keskellä on erittäin haavoittuvainen saastumisvaihe. Varo on tehtävä.

-Jos on tyypillisiä siirtokuntia S. aureus Sitä on vahvistettava ajamalla koagulaasitesti mainitulle venymälle.

-Jos koagulaasilla on epävarmia tuloksia, muut vahvistustestit on asennettava.

-Ole varovainen, ettet sekoita tyypillisten siirtokuntien läsnäoloa S. aureus Epätyypillisten mustien pesäkkeiden kanssa.

Viitteet

1. BD -laboratoriot. Baird Parker Agar. Saatavana osoitteessa: BD.com
2. Laboratoriot Francisco Soria Melguizo. Baird Parker Agar. Saatavana osoitteessa: http: // f-aria.Se on/tiedottaa