Bhi agar mikä on, perusta, valmistelu, käyttää

Hän Bhi -agar o aivojen sydämen infuusio. Se on ravitseva kiinteä viljelyalusta. Espanjaksi kutsumme häntä infuusiona Cerebro Heart Agar. Se on ei -selektiivinen viljelyalusta, mikä tarkoittaa, että voidaan kehittää kaikenlaisia ​​gram -positiivisia ja gram -negatiivisia bakteereja, samoin kuin joitain hiiva- ja rihmukannaisia ​​sieniä.

Se koostuu aivojen infuusiosta ja vasikan sydämestä, eläinten jälkeisestä peptisen hydrolyzista.

On huomattava, että BHI -agar on yksi yleisimmistä viljelyväliaineista bakteriologialaboratorioissa. Sitä voidaan käyttää ilman lisäravinteita ensisijaisena, subjektiivisena pesäkkeinä, jotka on saatu muissa selektiivisissä väliaineissa tai kantojen ylläpitämiseksi laboratoriossa.

Toisaalta, se on ihanteellinen keino käyttää perustana rikastettujen väliaineiden, kuten Blood Agar ja Chocolate Agar, valmistelussa. Molemmat ihanteet eristää vaativat mikro -organismit ravitsemuksellisesta näkökulmasta. On kuitenkin otettava huomioon, että koska se sisältää glukoosia, se ei sovellu hemolyysikuvioiden tarkkailuun.

Samoin BHI -agaria voidaan käyttää erityisten keinojen valmistukseen patogeenisten mikro -organismien eristämiseksi vaikeasta kasvusta yhteisissä väliaineissa, mukaan lukien: Hemophilus sp, Francisella tularensis, corynebacterium difteriae ja histoplasma capsulatum.

Antibioottisen lisäaineen kanssa BHI -agarista tulee selektiivinen väliaine sienieristykselle.

Perusta

Se on ravitseva viljelyväliaine eristää kohtalaisesti vaativat mikro -organismit, kykenemällä lisäämään sen rikastuttamista lisäämällä veri ja muut ravitsevat lisäravinteet.

Se on ei -selektiivinen viljelyalusta, siksi mahdollistaa useimpien positiivisten ja gram -negatiivisten bakteerien kasvun, samoin kuin jotkut sienet. Se voi kuitenkin tulla selektiivisesti lisäämällä antibiootteja.

Elatusaine sisältää aivojen ja vasikan sydämen infuusion, hydrolysoidun eläinkudoksen ja hydrolysoidun haiman kaseiinikudosta; Kaikki nämä yhdisteet toimivat vitamiinien, aminohappojen, typen ja hiilen lähteinä.

Voi palvella sinua: Entre Ríosin kasvisto ja eläimistö: edustavat lajit

Glukoosi on hiilihydraatti, joka tarjoaa energiaa mikro -organismeille, kun he ovat käyneet sitä. Natriumkloridi ja dinatriumfosfaatti ylläpitävät osmoottista tasapainoa ja tarjoavat pH: n lähellä neutraalisuutta. Lopuksi agar antaa kiinteän konsistenssin ympäristölle.

Valmistautuminen

Punnitse 52 grammaa kuivunut väliaine ja liukene litralle tislattua vettä. Vie seos lämmönlähteelle, kunnes se kiehuu, sekoittaen usein liukenemisprosessin aikana.

Voit valmistaa kiilat tai BHI -agar -levyt ilman lisäaineita.

Kiilat

Tarjoile valmiste kiilavalmistelua varten, kunnes ne täyttävät puolet jokaisesta putkesta, peitä ja steriloivat autoklaavissa 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan, kun menet sänkyyn pohjalle, kunnes ne jähmettyvät. Pysy myöhemmin jääkaapissa käyttöön.

BHI -kiilat bakteerille. Lähde: Kuva, jonka on ottanut MSC -kirjoittaja. Marielsa gil.

Levyt

Liuennut seos on autoklaava 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan, kun se lähtee, sen annetaan jäähtyä 50 ° C: seen ja tarjoillaan 20 ml elatusainetta Petri -steriileillä levyillä. Niiden on annettu jähmettyä, sijoittaa ja varastoida jääkaappiin, kunnes he käyttävät. Anna levyjen ottaa ympäristön lämpötilan ennen kylvää.

Keskipitkän pH: n on oltava 7,4 ± 0,2.

Valmistamaton väliaine on beige ja valmistettu on kevyt keltainen.

Veriagari

Steriloinnin jälkeen väliaine jäähdytä likimääräiseen lämpötilaan 45-50 ° C, lisää tuolloin verta (50 ml), sekoita varovasti homogenisoimaan ja tarjoilemaan 20 ml jokaisella Petri -levyllä. Jos levylle muodostetaan kuplia, kuplien kevyempi liekki niiden poistamiseksi tulee ohittaa nopeasti.

Samoin erityisväline voidaan valmistaa lisäämällä vastaavat lisäaineet, kun seos saavuttaa lämpötilan 45-50 ° C.

Voi palvella sinua: fyysiset ominaisuudet

Väliaine on kirsikkapunainen.

Sovellukset

Käytä ilman lisäravinteita

BHI -agar ilman lisäaineita on hyödyllinen ensisijaisena viljelynä ja kylvää puhdasta mikro -organismien kantoja vähän tai kohtalaisen vaativia sen myöhempää tunnistamista varten.

Koska se on vaaleanvärinen väliaine, se on ihanteellinen pigmenttien tarkkailuun ja myös ei ole häiritseviä aineita, joitain biokemiallisia testejä, kuten oksidaasi ja katalaasi, tai muiden biokemiallisten testien asentaminen tämän agarin pesäkkeistä.

Samoin BHI -agar on leveä.

Bakteerikannoilla istutettuja levyjä tai kiiloja inkubidaan 37 ° C: ssa 24 - 48 tunnin ajan. Lämpötila- ja inkubaatioaika riippuu sienissä etsittäviä sienten tyypistä.

Perusagarina muiden väliaineiden valmistelua varten

Tämän tukikohdan avulla voit valmistaa rikastettua ja valikoivaa mediaa.

Rikastunut

Sen päätehtävä on toimia perustana rutiininkäyttöisen veren valmistelussa mikrobiologialaboratorioissa. Erityisesti BHI -emäs on edistänyt kantojen eristämistä Streptococcus sp. Sillä on kuitenkin haittaa, että se ei ole riittävä hemolyysikuvioiden havaitsemiseen sisältämällä glukoosia.

Sitä käytetään myös kanin tai hevosen veren valmistuksessa Hemophilus sp. Parempien tulosten saavuttamiseksi voit lisätä rikastuslisän (Isavalex).

Jos näytteet tulevat hengityselimestä agariin, bakitraciinia voidaan lisätä estämään liittyvää kasvistoa ja lisäämään kantojen kantojen palautumisen todennäköisyyttä Hemophilus sp.

Toisaalta voit valmistaa verta (lampaan tai ihmisen) Cistina Telluriton kanssa eristämään Corynebacterium -kurkkukivy. Samoin se on hyödyllinen kanin veren valmistuksessa, ja Centeenin aggregaatti ja glukoosi Francisella tularensis.

Veren agarlevyjen kylvö tapahtuu uupumuksella ja inkubidaan 35-37 ° C: ssa 24-48 tunnin ajan mikroaerofiliassa (5-10% CO: sta₂-A.

Voi palvella sinua: fylogeneettinen puu: tyypit ja niiden ominaisuudet, esimerkit

Valikoiva

Tämä väliaine antibioottien aggregaatilla voi korvata Sabouraud -agarin sienieristykseen.

BHI -agar yhdistettynä kloramfenikoli - gentamysiiniin tai penisilliiniin -, streptomysiini ja hevosveri ovat ihanteellisia eristämiseen Histoplasma capsulatum.

Riippuen mikro-organismista, jota pyritään eristämään inkubaatio 35-37 ° C: ssa tai huoneenlämpötilassa aerobioosissa. Joskus inkubointi molemmilla lämpötila -alueilla on välttämätöntä, käyttämällä tähän 2 levyä tähän.

Jotkut sienet pitävät Trichophyton Mentagrophyyt Niitä on inkuboida huoneenlämpötilassa jopa 7 päivän ajan.

QA

Jokaisesta valmistetusta erästä on suositeltavaa inkuboida 1 levy tai kiila 37 ° C: ssa 24 tunnin ajan ja varmistaa, että kasvua ei ole; Varsinkin se on tärkeää verta valmistettaessa, koska se on helposti saastuttava väliaine.

Toisaalta väliaineen laatua voidaan arvioida tunnettujen tai sertifioitujen kuvioiden kantojen inokulointi ja sen kehityksen tarkkailu.

Tässä mielessä BHI -agarin arvioimiseksi ilman lisäaineita voit käyttää kantoja Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 o Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C: ta inkuboidaan aerobioosissa 24 - 48 tuntia. Kaikissa tapauksissa odotetaan tyydyttävää kasvua.

Arvioidaksesi veriagarilevyjä, jotka voit kylvää kantoja  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 tai Trichophyton Mentagrophyyt ATCC 9533.

Bakteerikannoja inkubidaan 37 ° C: ssa mikroaerofiliassa 24 tunnin ajan, kun taas sieni inkuboi huoneenlämpötilassa kosteassa kammiossa 7 päivään saakka. Kaikissa tapauksissa tyydyttävä kasvu odotetaan.

Viitteet

1. Britannia Laboratories. Brain Heart Infusion Agar. Saatavana osoitteessa: Britanialab.com.
2. BD -laboratoriot. Brain sydämen infuusio (BHI) agar. Saatavana osoitteessa: BD.com.