Biggy agar, valmistelu ja käyttö

Hän Biggy Agar Se on vankka, selektiivinen ja differentiaalikulttuuriaine. Se on suunniteltu eristämään ja auttamaan Candida -päälajin tunnistamista. Hänen nimensä Biggy tulee lyhenteestä englanninkielisessä vismuth glukoosiglysiini hiivat.

Alkuperäisen kaavan on luonut Nickerson, joten tämä väline tunnetaan myös nimellä Nickerson Agar. Se koostuu tällä hetkellä hiivauutetta, glysiinistä, dekstroosista, ammoniumsitraatista, vismuttisitraatista, natriumsulfiitista ja agarista.

Biggy -agarin graafinen esitys. Lähde: Flickr.com

Biggy Agar on muotoiltu monimutkaisten lajien erilaistumiseen C. Albicans, c. Tropicalis, c. Krusei ja C. Kefyr, Mutta muut lajit, kuten Candida glabrata, c. parapsiloosi, c. Guilliermondii, Trichhosporun SP, Geotrichum Candidum ja Saccharomyces cerevisiae.

Sillä on kuitenkin hyvä herkkyys ja spesifisyys, kun verrataan sitä muihin väliaineisiin, joilla on samanlainen funktio, tämä on toisella sijalla, Chromagar on voittanut sen. Tästä syystä monet laboratoriot mieluummin jälkimmäistä, vaikka se on paljon kalliimpaa.

Pitäisi olla selvää, että Biggy Agarin ja muiden vastaavien keinojen käyttö auttaa nopeaa oletettua tunnistamista, mutta ei koskaan vahvistava. Siksi lisätunnistusmenetelmiä on saatavana; Esimerkiksi Vitek 32 ja API 20 tunnistusjärjestelmät.

[TOC]

Perusta

Biggy -agaria pidetään osittain selektiivisenä väliaineena hiivojen, erityisesti Candida -sukujen eristämiselle, vaikka muut genrit voivat kasvaa.

Se on myös differentiaalinen väliaine, koska mukana olevista lajeista riippuen havaitaan erilaisia ​​ominaisuuksia, värejä, muotoa ja kokoa. Sitä pidetään kromogeenisenä väliaineena monipuolisten värien kehittymiseksi pesäkkeissä.

Voi palvella sinua: Metionine: Ominaisuudet, toiminnot, ruoka, edut

Hiivojen pesäkkeiden esittämä väri johtuu vismuttisulfiitin läsnäolosta agarissa. Nickerson tajusi, että suvun hiivot Candid. Tämä on peräisin valon välistä pesäkkeitä mustana.

Tämä agar sisältää hiiva- ja dekstroosiuutteen, joka tarjoaa perusravinteiden ja energian lähteen hiivojen kehitykseen. Glysiini on hiivojen kasvua stimuloivat samalla kun estävät tiettyjen bakteerien kehitystä.

Tässä mielessä ammonium- ja vismuttisitraatti sekä natriumsulfiitti toimivat bakteerien kasvun estäjinä. Agar on aine, joka antaa kiinteän konsistenssin ympäristölle.

Valmistautuminen

Punnitse 45 g dehydratoitua viljelmää ja liukene litraan tislattua vettä. Ravista ja lämmitä seosta, antamalla kiehua 1 minuutin ajan täydelliseen liuokseen. Tätä viljelyalusta ei ole steriloitu autoklaavessa.

Kun jäähdytetään noin 45 ° C Mariassa, kaada 20 ml Petri -steriileille levyille.

Dehydratoidun väliaineen väri on kellertävä ja valmistettu harmaa on kellertävä valkoinen geeli, jossa voidaan havaita lievä flokkulantti sakka.

PH: n on oltava 6,8 ± 0,2.

Valmistettu väliaine on säilytettävä jääkaapissa (4 ° C) ja suojattava valolta. Kuten keino, jota ei itse -clavaa tulisi käyttää mahdollisimman pian. Sen käyttöä suositellaan ennen kuin se täyttää 3 päivää sen valmistelusta.

Voi palvella sinua: biomateriaalit

Käyttää

Levyjä inkuboidaan huoneenlämpötilassa (25 ° C) 24, 48 ja 72 tuntia, inkubaatioaikaa voidaan pidentää 5 päivään asti.

Jokainen Candida -laji kehittää tiettyjä ominaisuuksia, jotka saavat ne erottamaan toisistaan. Keskipitkät valmistajat kuvaavat seuraavia ominaisuuksia jokaiselle lajille:

-Candida albicans -kompleksi: Se kehittyy tässä agarissa sileäksi, pyöreäksi, ruskeaksi tai mustaksi pesäkkeeksi, jolla on pieni myseeli. Varauksen kanssa, että tumma väri ei ole levinnyt ympäristöön.

-Candida tropicalis: Kirkas, pienet, tummat kirkkaat pesäkkeet, mustalla ja kevyellä myseelillä. Tumma väri leviää kohti ympäristöä, tyypillinen ominaisuus, joka on tyypillinen tälle lajille, kun sitä on inkuboitu 72 tuntia.

-Candida Krusei Kehitä karkea, litteä näköinen pesäkkeet, reuna ruskean välillä Negruzco.

-Candida parakrusei: Keskikokoiset siirtokunnat, suurimman osan ajasta karkealla ulkonäöllä, litteä. Väri voi vaihdella kirkkaan tumman punertavan kahvin välillä vaalean punertavan kahvin välillä. Pesäkkeiden reunalla on laaja, kellertävä sieneeli.

-Candida stellelatoid: Kehitä keskipitkät, litteät pesäkkeet, tummanruskea, melkein musta. Mosteen kehitys on hyvin vähän.

Yüesoyn ja Marolin vuonna 2003 tekemä tutkimus osoitti, että Chromagar -väliaine on parempaa herkkyyttä ja spesifisyyttä eri Candida -lajien erilaistumisessa ja tunnistamisessa kuin Biggy Agar.

QA

Steriiliöiden hallintaa varten levyjä inkubidaan ilman inokulointia 25 ° C: ssa, pimeydessä 24 - 48 tuntia, odotetaan, että minkäänlaista kasvua tai värimuutosta ei tapahdu.

Se voi palvella sinua: kosketustunne: Osat, miten se toimii ja toimii

Suositellut ATCC -kannat keskipitkän laadunvalvonnan suorittamiseksi ovat:

Candida albicans -kompleksi  ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida Krusei ATCC 34135. Kaikkien kasvun odotetaan olevan edellä kuvattu.

Voit käyttää myös seuraavia kantoja:

Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ja Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. Kahdessa ensimmäisessä odotetaan kokonais estämistä, mutta osittain kasvattamisen tapauksessa pesäkkeet ovat kerman väriä.

Siinä tapauksessa että S. aureus Sen odotetaan olevan täysin estetty, mutta jos ne kasvavat osittain, heidän pesäkeet ovat valkoisia.

Rajoitukset

Jotkut bakteerit kykenevät kehittämään tässä väliaineessa ja voivat jopa pimeää, simuloimalla Candida -naapuri.

Taulukko: Joidenkin Biggyn hiivojen siirtokuntien ominaispiirteet sopivat työhön Yücesoy m ja marol s.

Lähde: Yücesoy M, Marol S. Chromagar Candida- ja Biggy -agarin suorituskyky hiivalajien tunnistamiseksi. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7

Viitteet

1. Yücesoy M, Marol S. Chromagar Candida- ja Biggy -agarin suorituskyky hiivalajien tunnistamiseksi. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7.
2. MCD -laboratorio. Biggy ikääntyvä tekninen tiedosto. Saatavana osoitteessa: McDlab.netto/
3. Laboratorio Neogen. Biggy Agar. Saatavana osoitteessa: FoodSefety.Neogen.com
4. Conda pronadisa -laboratoriot. Biggy Agar. Saatavana osoitteessa: Condalab.com
5. BD -laboratoriot. BD Biggy Agar (Bismuttiglukoosi Glycine Yaest Agar). 2011. Saatavana osoitteessa: BD.com