Tioglikolaattilieme -säätiö, valmistelu ja käytöt

Hän Tioglykoliliemi Se on rikastettu keino nesteen konsistenssissa. Se tunnetaan lyhenteellä FTM). Sen on luonut Brewer ja muutti vuonna 1944 Vera, joka sisällytti hänet caseiinin peptoniin.

Tällä väliaineella on alhainen hapettumispotentiaalin vähentäminen, joten sitä ei suositella tiukkojen aerobisten bakteerien kehittämiselle, mutta se on ihanteellinen valinnaisten aerobisten bakteerien, tiukkojen ja mikroaerofiilisten anaerobisten bakteerien kehittämiseksi, anaerobiset bakteerit.

Tioglykoliliemi ilman indikaattoria. Näytteen emättimen eritys. Lähde: Bobjgalindo [CC BY-SA 4.0 (https: // creativecommons.Org/lisenssit/by-SA/4.0)]

Tämän väliaineella havaittu korkea suorituskyky monenlaisten mikro -organismien eristämisessä ja palautumisessa on saanut sen vastaan ​​Yhdysvaltain farmakopoeia (USP), maatalouden kemistien (AOAC) ja Euroopan farmakoopoiden (EP) virallinen yhdistys (AOAC) ja Euroopan apteekki.

Nämä organisaatiot suosittelevat sitä farmaseuttisten tuotteiden steriiliyden hallintakokeille ja erityyppisten näytteiden rikastumiseen.

Tioglykolaatti Cado koostuu hiivauutetta, digreatiasta kaseiinista, vedettömästä dekstroosista, L-sykineistä, natriumkloridista, natrium-tioglykolista, lepo- ja piikistä pienessä määrässä pienessä määrässä.

Tämän väliaineen versioita on useita, heidän joukossaan ovat: Tioglykolediliemi, jossa on indikaattori, tioglykoliliemi ilman indikaattoria, tioglykoliliemiä, jossa on rikkausindikaattori hemiinin ja K -vitamiinin kanssa_1, Ja tioglicolaattiliemi, jolla on kalteva karbonaatti.

On huomattava, että hemiinillä ja K -vitamiinilla rikastetun tioglykotediliemin variantti parantaa vaativien tiukkojen anaerobien kasvua, ja kalsiumkarbonaattia sisältävien tilojen liemaa sisältävien tioglykoliliemin variantti on hyödyllinen mikrobisen kasvun aikana tuotettujen happojen torjumiseksi.

[TOC]

Perusta

Tioglykoloilemaa pidetään rikastumisena, ei selektiiviseksi, koska se mahdollistaa useimpien ei -tarvittavien bakteerien kehittämisen. Ravitsemusvaatimukset tarjoavat hiivauutetta, haiman pilkottu ja glukoosi.

Toisaalta tämä väliaine huolimatta liemeistä on pieni määrä agaria; Tämä aiheuttaa alhaisen oksidin vähentämispotentiaalin, koska hapen pääsyjarrut, niin että happi vähenee, kun se syvenee putken sisällä.

Siksi tämä väliaine on ihanteellinen valinnaisten aerobisten bakteerien, mikroaerofiilien ja tiukkojen anaerobisten kehitykseen, nämä viimeiset 2 ilman inkubointia näissä olosuhteissa. Sama väliaine säätelee hapen määrää ympäristössä, putken pohjassa ja riittävästi pinnalla.

Voi palvella sinua: fenyylialaniini: ominaisuudet, toiminnot, biosynteesi, ruoka

Samoin tioglykolaatti ja L-Scistiine toimivat pelkistävinä aineina, mikä edistää bakteerien kehitykselle haitallisten aineiden kertymistä, kuten peroksidia. Lisäksi nämä yhdisteet sisältävät sulfidriilit (-sh-) -ryhmiä, jotka neutraloivat elohopeajohdannaisten, arsenikaalisia, muun muassa raskasmetallien joukossa.

Toisaalta levottomuus on oksidin vähentämisindikaattori. Tämä aine on väritön, kun se on vähentynyt ja vaaleanpunainen, kun se hapettuu. Siellä on tioglikolaattiliemen variantteja indikaattorilla ja ilman indikaattoria. Sen käyttö riippuu näytteen tyypistä ja laboratorio -mieltymyksistä.

Samaan aikaan natriumkloridi ylläpitää tioglykaatin liemen osmoottista tasapainoa ja anhydraglukoosin käyttö estää ylimääräistä kosteutta kuivuneessa ympäristössä.

Valmistautuminen

Tioglykoloilmikentti indikaattorilla

Punnitse 29,75 g dehydratoitua väliainetta ja liukene 1 litraan tislattua vettä. Seos jätetään noin 5 minuutissa. Tuo lämmönlähde ja sekoita usein, kunnes se liukenee kokonaan.

Kaada väliaine koeputkiin ja autoklavaatti 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan. Anna jäähtyä ennen käyttöä. Tarkista kaupallisen talon lisäys sen säilyttämiseksi. Jotkut suosittelevat säästämistä huoneenlämpötilassa pimeässä paikassa ja toiset jääkaapissa suojattuna valolta.

Valmistettu väliaineen pH on 7,1 ± 0,2.

Dehydratoidun väliaineen väri on kevyt ja valmistettu beige on selkeä keltainen, jolla on jonkin verran opalescence.

Tioglykoloi lieme hemiini- ja K -vitamiinin indikaattorilla₁

On kaupallisia medioita, jotka tuovat jo hemina ja K -vitamiini₁, Erityinen anaerobiseen viljelyyn.

Jos sinulla ei ole rikastettua väliainetta anaerobeille, perus -tioglykoloiva liemi voidaan valmistaa. Tätä varten lisätään 10 mg hemiinihydrokloridia ja 1 mg K -vitamiinia₁ Jokaiselle litralle. Kuitenkin, jos veri tai seerumi lisätään tioglykolilemiin, hemiinin lisääminen, K -vitamiini ei ole välttämätöntä.

Voi palvella sinua: Sisäinen erityinen kilpailu: Ominaisuudet, tyypit ja esimerkit

Tioglykoloi lieme kalsiumkarbonaatilla

Tulee kaupallisesti ja valmistelee insertin ohjeita.

Tioglykoliliemi ilman indikaattoria

Tällä on sama koostumus tioglysaattiin, mutta se ei sisällä resatsuriinia.

Punnitse 30 g dehydratoitua väliainetta ja liukene litraan tislattua vettä. Loput valmistelusta on yhtä suuri kuin tioglykaattiliemessä kuvattu indikaattorilla.

Käyttää

Tioglykoloililiemi on hyödyllinen kliinisten näytteiden rikastamisessa, etenkin steriilien alueiden näytteille. Se on hyödyllinen myös ei -kliinisille näytteille, kuten kosmetiikka, lääkkeet jne.

Nestemäisten näytteiden (kuten CSF: n, synoviaalisen nesteen) inokuloimiseksi näytteet sentrifugoivat ensin ja sitten 2 tippaa sedimenttiä ja asetetaan tioglykoliliemiin,. Inkuboi 35 ° C: ssa 24 tunnin ajan. Jos kasvua ei tällä hetkellä ole (sameus), sitä inkuboidaan enintään 7 päivään saakka.

Jos näyte otetaan Hiopuksen kanssa, viljelyväliaineet ympätävät ensin levyihin ja lopulta tampo otetaan liemeen, osa erottuu ja putki peitetään, jättäen tampon sisälle sisälle. Incuba 35 ° C: ssa 24 tunnin ajan, enintään 7 päivää.

Kiinteät näytteitä varten se on homogenisoitava fysiologisessa suolaliuoksen (SSF) liuoksessa ja inokuloidaan sitten tioglykolilieme 2 tippaa suspensioon.

Joskus sitä voidaan käyttää kuljetusvälineinä näytteille.

Kalsiumkarbonaatin kanssa käytettyä tioglykoloiliemon varianttia käytetään kontrollien ylläpitämiseen pidemmän ajan, koska sillä on kyky neutraloida glukoosin käytön tuottamat hapot; Nämä hapot ovat myrkyllisiä tietyille bakteereille.

Tioglykoliliemin kasvua havaitaan ympäristön sameuden vuoksi. On suositeltavaa suorittaa grammavärjäys ja myöhemmin subjektiivinen ei -selektiivisissä ja selektiivisissä väliaineissa, riippuen näytteen tyypistä ja mikro -organismeista, joista heitä epäillään.

QA

Steriiliyshallinnassa on suositeltavaa inkuboida yksi tai kaksi liemiä ilman inokulointia. Odotettu tulos on läpinäkyvä liemi, ilman värinmuutosta, vaikka se on normaalia, että putken pinnalla havaitaan pieni vaaleanpunainen väri.

Se voi palvella sinua: Marine Meadow: Mikä on, ominaisuudet, kasvisto, eläimistö

Laadunvalvonnan suhteen välillä 10 - 100 UFC: tä sertifioiduista ohjaimista, kuten Staphylococcus aureus ATCC 6538, Micrococcus luteus ATCC 9341, Bacillus subtilis ATCC 6633, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Clostridium sporogenes ATCC 19404, Clostridium sporogenes ATCC 11437, Vulgatus bakteroidit ATCC 8482.

Inkuboitu 30-35 ° C: ssa aerobioosissa 24 tunnin ajan enintään 3 päivään, koska nämä mikro-organismit ovat nopeaa kasvua.

Kaikissa tapauksissa odotetaan hyvää kehitystä lukuun ottamatta Micrococcus luteus ja Bacillus subtilis, Jos kehitystä voi olla kohtuullista.

Heminalla ja K -vitamiinilla rikastetun tioglykoliliemin laadunvalvontaa varten₁, Ohjauskantoja voidaan käyttää Vulgatus bakteroidit  ATCC 8482, Clostridium perfringens ATCC 13124 ja Fragilis bakteroidit ATCC 25285. Odotettu tulos on tyydyttävä kasvu.

suositukset

-Joskus voidaan nähdä, että indikaattorin tioglykaatin liemen pinta muuttuu vaaleanpunaiseksi; Tämä johtuu ympäristön hapettumisesta. Jos vaaleanpunainen väri kattaa vähintään 30% kokonaisliemettä, joka voidaan lämmittää vesihauteessa 5 minuutin ajan, jäähdytä uudelleen ja käyttää.

Tämä eliminoi absorboituneen hapen palauttaen väliaineen alkuperäiseen väriinsä. Tämä menettely voidaan tehdä vain kerran.

-Aerobisten bakteerien kasvun parantamiseksi sitä on inkuboitu hieman laiskaan kannen kanssa. Tätä tarkoitusta varten on kuitenkin edullista käyttää infuusioliemen aivojen sydän tai triptinen soijaliemi tiukkojen aerobien hyvään kehitykseen.

-Ympäristön jäädyttämistä tai ylikuumenemista tulisi välttää, koska molemmat olosuhteet vahingoittavat väliainetta.

-Suora valo vahingoittaa viljelyalusta, se on suojattava valolta.

Viitteet

1. Britannia Laboratories. USP -tioglykolaatti indikaattorilla. 2015. Saatavana osoitteessa: Labbritania.com.
2. Quos sas laboratoriot. 2019. Tioglykoliliemi. Saatavana osoitteessa: quios.com.yhteistyö
3. BD Laboratories Fluid Tioglykollate -väliaine (FTM). 2003. Saatavana osoitteessa: BD.com/Eurooppa
4. Putkissa valmistettu BBL -väliaine anaerobisten mikro -organismien viljelyyn. Tioglysate media. 2013. Saatavana osoitteessa: BD.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott -mikrobiologinen diagnoosi. 12 Ed. Pan -American toimitus.-Lla. Argentiina.