Hektoen -säätiö, valmistelu ja käyttää

Hän Haktoen -agar o Agar Hektoen Enterc on vankka, selektiivinen ja differentiaalinen viljelyalusta. Sen perustivat King ja Metzger Hektoen -instituutissa Shigella- ja Salmonella -genrejen enteropatogeenisten bakteerien eristämiseksi.

Elatusaine koostuu peptoniproteiinista, hiivauutteesta, sappisuoloista, laktoosista, sakkaroosista, saliciinista, natriumtriosulfaatista, natriumkloridista, rautasitraatista, ammoniumitraatista, bromoolista sinistä, happofutsiinia ja agaria ja agaria. Tämä formulaatio mahdollistaa Shigella- ja Salmonella -genrejen erottamisen muista bakteereista, jotka kykenevät kasvamaan tässä väliaineessa.

-Lla. Hektoen virgen b ague b. Haktoen Agar kylvetty. Lähde: Flickr.com/alkuperäinen lataus oli Philippinjl ranskalaisessa Wikipediassa. [CC BY-SA 2.0 FR (https: // creativecommons.Org/lisenssit/by-SA/2.0/fr/teko.sisään)]

Vaikka on olemassa muita väliaineita, joilla on sama tehtävä kuin Hektoen -agar, tällä on suurempi etu verrattuna muihin väliaineisiin, etenkin kun he haluavat palauttaa Shigella -lajit.

Molempien sukujen lajit aiheuttavat vakavia maha -suolikanavan ongelmia ihmisen saastuneiden elintarvikkeiden kulutuksen vuoksi; Siksi lähetys on uloste-. Siksi Hektoen -agarin käyttö on pääosin ilmoitettu ulosteiden ja elintarvikkeiden mikrobiologisessa analyysissä.

[TOC]

Perusta

Hektoen -agar sisältää peptoneja ja hiivauutetta ravintoaineiden lähteenä, mikä tarjoaa olennaiset elementit mikrobikehitykselle.

Siinä on kuitenkin myös sappisuoloja, jotka vaikuttavat joidenkin bakteerien, erityisesti grampositiivisten ja joidenkin gram -negatiivisten kasvun estämiseen. Tästä syystä sitä pidetään selektiivisenä väliaineena.

Toisaalta Hektoen -agar on erotusväliaine. Tämän ominaisuuden annetaan käymiskelpoisten hiilihydraattien, kuten laktoosin, piirtämisen ja salisyiinin, läsnäolo, pH.

Voi palvella sinua: Sismonetia

Kaikissa tässä väliaineessa kykenevät bakteerit, jotka eivät kuulu Salmonella- ja Shigella -sukuun, kehittyvät lohi- tai appelsiinipesäkkeet paitsi sukuproteus. Tämä johtuu yhden tai useamman läsnä olevan hiilihydraatin käymisestä, joka happea väliaine, joka tekee pH -indikaattorista käännöksen.

Toisaalta suvut Shigella ja salmonella eivät kykene käymään mitään läsnä olevista hiilihydraatteista käyttämällä vain peptonia energian lähteenä, joka alkalisoi väliaineen ja siksi niiden pesäkkeet ovat vihreänsinisiä.

Myös tässä väliaineessa bakteerit, jotka kykenevät muodostamaan rikkivety (väritön kaasu), voidaan erottaa tässä väliaineessa. Natriumtriosulfaatti toimii sulfidilähteenä, kun taas rautasitraatti on paljastava aine. Molemmat yhdisteet tekevät mahdolliseksi rautasulfidin mustan sakan muodostumisen, joka osoittaa reaktion.

Musta sakka pesäkkeen keskellä läpinäkyvällä halolla ympärillä antaa kalan silmän. Tämä ominaisuus viittaa Salmonella -genren esiintymiseen.

Lopuksi natriumkloridi ylläpitää osmoottista tasapainoa ja agar tarjoaa vankan konsistenssin ympäristölle.

Valmistautuminen

Punnitse 76 g dehydratoitua väliainetta ja liukene litraan tislattua vettä. Varo seosta ja jätä sitten levossa 10-15 minuuttia. Sitä voidaan lämmittää ja kiehua, jolloin pyörivät liikkeet sen kokonaisliuottamiseen saakka. Tätä väliainetta ei ole steriloitu autoklaavessa.

Kun väliaine saavuttaa likimääräisen lämpötilan 45 ° C, petri -steriilien levyjen tilavuus 20 ml kaadetaan suoraan.

Voi palvella sinua: väestödynamiikka

Agar on jähmettynyt. Tuolloin he ovat jo valmiita käytettäväksi. On suositeltavaa käyttää niitä välittömästi. Jos niitä ei ole mahdollista, niitä pidetään jääkaapissa ennen niiden käyttöä.

Levyt on poistettava etukäteen jääkaapista ennen kylvää niitä ympäröivän lämpötilan ottamiseksi.

Keskipitkän pH: n on oltava 7,5 ± 0,2. Dehydratoidun väliaineen väri on violetti ja valmistettu väri on ruskea vihreä.

Käyttää

Hektoen -agarin käyttöä suositellaan Shigella- ja Salmonella -bakteerien etsimiseen elintarvikkeissa ja ruoanäytteissä.

Näiden bakteerien eristämisen mahdollisuus lisääntyy huomattavasti, jos näyte erityisliemeissä on aiemmin rikastettu.

Inokulumin on oltava vahvaa ja istutus tehdään strressiolla. Levyjä inkuboidaan 37 ° C: ssa 24 - 48 tuntia aerobioosissa.

Inkubointia 48 tunnin ajan suositellaan, koska pesäkkeiden ominaisuudet ovat selkeämpiä tulkinnan ja erilaistumisen kannalta tällä hetkellä.

QA

Laadunvalvonnan suorittamiseksi tälle väliaineelle käytetään sertifioituja bakteerikantoja, kuten: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Shigella flexneri ATCC 12022 ja Shigella Sonnei ATCC 25931.

Odotetut tulokset ovat seuraavat: Salmonella typhimurium ja  Salmonella Enteritidis Niiden on kehitettävä vihreitä - sinertäviä pesäkkeitä mustalla keskuksella tai ilman. Kun taas Shigella -lajit kasvavat vihreinä - sinertäviä pesäkkeitä.

Voit myös sisällyttää kantoja Escherichia coli ATCC 29212, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212 ja Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Voi palvella sinua: Lactosado -liemi

Näissä tapauksissa havaitut ominaisuudet ovat seuraavat: JA. koli ja K -k -. pneumoniae Ne kehittyvät tässä keskisuurissa pesäkkeissä värilohen oranssiin, samanaikainen sakka ympärillä. Kun taas Proteus kehittää sinivihreitä pesäkkeitä mustalla keskuksella tai ilman sitä.

Sillä aikaa S. aureus ja  JA. Faecalis Niitä on estettävä, joskus JA. Faecalis onnistuu kasvamaan keltaisina, hyvin pieninä pesäkkeinä.

Toisaalta, koska tätä väliainetta ei ole steriloitu autoklaavessa, on tärkeää arvioida väliaineen steriiliys. Siksi jokaisesta valmistetusta erästä niitä on inkuboida yhdestä kahteen levyyn ilman inokuloimalla 37 ° C 24 tunnin ajan aerobioosissa.

Lautasella ei selvästikään ole odotettu.

Rajoitukset

-Proteus -lajit voivat kehittyä tässä väliaineessa, ja niiden pesäkkeiden ominaisuudet voidaan sekoittaa salmonella- tai shigella -lajeihin. Tästä syystä jokainen epäilyttävä pesäke on vahvistettava biokemiallisilla testeillä.

-Tämän väliaineen käyttö on tarpeen muiden vähemmän selektiivisten ikien kanssa, koska jos haluttu mikro -organisme on alhaisissa pitoisuuksissa, se ei voinut kehittyä tässä väliaineessa.

-Älä ylikuumene sen valmistuksen aikana, koska liiallinen lämpö muuttaa ympäristön koostumusta.

-Laktoosin fermentointi salmonella voi esiintyä epätavallisen pesäkkeitä, jotka voivat jäädä huomaamatta.

Viitteet

1. Wikipedian avustajat. Hektoen Enteric Agar. Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 13. maaliskuuta 2019, 23:38 UTC. SAATAVILLA: .Wikipedia.Org/ pääsy 16. maaliskuuta 2019.
2. BD -laboratoriot. BD Hektoen Enteric Gang (hän ​​Gank). 2013. Saatavana osoitteessa: BD.com
3. Britannia Laboratories. Hektoen entérico agar. 2015. Saatavana osoitteessa: Britanialab.com
4. Diffco Laboratories Francisco Soria Melguizo. Haktoen -agar. Saatavana osoitteessa: F-Soria.On
5. Difco & BBL -käsikirja, Hektoen Enterric Agar. 2. painos. Saatavana: BD.com/Eurooppa