Peptonada -säätiö, valmistelu ja käyttö

Hän Peptonada -vesi Se on keino nestemäiseen rikastumiseen, ei selektiivinen, pääasiassa elintarvikkeiden tai muiden materiaalien laimennelmana. Tämä tarkoittaa kemiallisesta näkökulmasta hyvin yksinkertaista, se sisältää lihan, natriumkloridin ja veden peptonia.

Sillä on jonkin verran ravintoarvoa, mikä mahdollistaa näytteen rikastuttamisen. Jos on pahoinpideltyjä bakteereja, tällä väliaineella on voima korjata elinkelpoisuus. Se on erityisen hyödyllinen Enterobacteriaceae -perheeseen kuuluvien bakteerien palautumisessa.

Peptonada vesi purkkeina. Lähde: MSC. Marielsa gil

Salmonellasten palautumisen tapauksessa suositellaan puskuroitu Peptonada -vesivariantin käyttöä; Tämä toimii keinona näytteen edeltäväksi rikastumiselle, tässä tapauksessa se sisältää muita elementtejä, kuten dysótic-fosfaatti ja dipotassiumfosfaatti.

Normaalisti Peptonada -vesi valmistelee neutraalia pH: ta, mutta on kuitenkin muitakin variantteja, joissa pH on välttämätöntä 8,5 ± 0,2 (alkali), koska eristämään tarkoitetut bakteerit ovat alkalofiiliä Vibrio cholerae.

Toisaalta tätä väliainetta voidaan käyttää pohjaväliaineena hiilihydraattien käymistesteihin.

[TOC]

Perusta

Peptonat tarjoavat bakteerien kehitykseen tarvittavat ravinteet, erityisesti typpi- ja lyhyen ketjun aminohapot, kun taas natriumkloridi ylläpitää osmoottista tasapainoa.

Lisäksi väliaine mahdollistaa dispersioiden, homogenisoida ja korjata bakteerisoluja, jotka on vaurioitunut alistumalla teollisuusprosesseihin.

Koska laimennus on ihanteellinen, korvaa tehokkaasti fysiologisen liuoksen (SSF) tai fosfaatin vaimennusliuosta (PBS).

Bakteerien kasvu käy ilmi saman saman.

Valmistautuminen

Kotitekoinen (ei -kaupallinen) valmistelu

Punnitse 1 g peptonia ja 8,5 g natriumkloridia, liukene 1 litraan tislattua vettä. PH on säädettävä arvoon 7,0. Tätä varten voit käyttää natriumkloridia 1 n.

Voi palvella sinua: ohimenevät viljelykasvit

Valmistelu kaupallisella väliaineella

Punnitse 15 g dehydratoitua väliainetta ja liukene litraan tislattua vettä. Homogeenisoi seosta. Seosta keitetään tarvittaessa yhden minuutin ajan kokonaisliuoksen auttamiseksi. Tarjoile 100 ml purkkeissa tai 10 ml: n putkissa tarvittaessa. Autoklaari 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan.

Viileä ja käytä jääkaapissa. Väliaineen lopullinen pH on 7,2 ± 0,2.

Dehydratoidun väliaineen väri on kevyt ja valmistettu beige on kirkas keltainen.

Valmistelu käymistesteihin

Aikaisempaan valmisteluun - steriloinnin jälkeen - hiilihydraatti tulisi lisätä lopulliseen 1%: n pitoisuuteen, plus Andrade -indikaattori (happo futsiini) tai punainen fenoli (0.018 g/l). Putket tulee sijoittaa Durham Bell -kaasun muodostumisen havaintoon.

Muut Peptonada -vesivariantit

-Puskuroitu Peptonada -vesi

Tämä sisältää entsymaattisen kaseiinin hydrolysoidun, natriumkloridin, kaliumin dihydrogeenisen fosfaatin ja vedyn natriumdodekahydraatin natriumfosfaatin. Lopullinen pH on 7,0 ± 0,2.

Valmistamiseksi punnitse 20 g dehydratoitua väliainetta ja liukene 1 litraan tislattua vettä. Jättää noin 5 minuuttia. Kuumenna 1 minuutti, kunnes se on täysin liuennut.

Kaada riittävät purkit tarpeen mukaan. Sterilisoi autoklaavin käyttäminen 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan.

-Emäksinen pepnada -vesi

Punnitse 25 g dehydratoitua väliainetta ja liukene 1 litraan vettä. Edellä kuvatulla tavalla. PH on välillä 8,3 - 8,7.

Käyttää

Inoculum tehdään asettamalla näyte suoraan.

Sitä käytetään näytteiden laimentamiseen, varsinkin kun epäillään, että bakteereja voi olla vaurioituneita. Laimennot ovat yleensä 1:10 ja 1: 100.

Voi palvella sinua: Miksi sienet eivät tuota omaa ruokaa?

Sitä inkuboidaan 24 tuntia aerobioosissa 35-37 ° C: ssa.

Ulosteenäytteet

Salmonellan etsimisenäytteitä varten suositellaan puskuroitua tai puskuroitua veden käyttöä pre-enriquen keinona.

Jatka seuraavasti:

Jos ulosteet muodostetaan ottamaan 1 g näytteitä. Jos ne ovat nestemäisiä, ota 1 ml ulosteita ja suspendoi putkeen 10 ml puskuroitua Peptonada -vettä. Peräsuolen pyydystäen lataa putken tampoon sisältävä materiaali Peptonada -puskuroitulla vedellä.

Sekoita ja homogenisoi näyte kaikissa tapauksissa erittäin hyvin.

Inkuboi 37 ° C: ssa 18 - 24 tuntia. Myöhemmin rikastusliemessä subulttuurinen selenito-liemekystiini tai tetrakaattiliemi 37 ° C: ssa 18–24 tuntia enemmän. Lopuksi kasvaa valikoivissa väliaineissa salmonellaan, kuten Agar SS, Agar XLD, Hektoen Agar, muun muassa.

Elintarvikkeet

Peptonada-vettä käytetään rikastusvälineinä tai yksinkertaisena laimennelmana, mutta jos salmonellalajeja etsitään, sitä käytetään pre-enriquen keinona, kuten jo on jo kuvattu.

Ruoassa jatka seuraavasti:

Kiinteät elintarvikkeet pahoittelevat 25 g: tä näytettä ja nestemäisiä ruokia, mitat 25 ml samaa. Aseta tämä osa purkkeihin, jotka sisältävät 225 ml Peptonada -vettä. Sekoita ja homogenisoi näyte.

Jos epäillään, että mikrobikuormitus on korkea, voidaan suorittaa sarja- tai desimaalimuodostumisia helpottamiseksi muodostuvien pesäkkeiden lukumäärän (UFC) määrän helpottamiseksi (UFC).

Laimennusten lukumäärä riippuu näytteen tyypistä ja analyyttisestä kokemuksesta.

Jos päinvastoin epäillään, että mikrobikuormitus on erittäin alhainen, laimennoksia ei tarvitse suorittaa. Myöhemmin subjektiivinen valikoivassa mediassa.

Voi palvella sinua: Katalaasi: Ominaisuudet, rakenne, toiminnot, patologiat

Meren ruoan, kuten merenelävien, kalojen, etsimistä Vibrio cholerae tai muita Vibrio -lajeja, Peptonada -vettä, joka on säädetty pH: hon 8,5 (alkalinen pepnada -vesi) tulisi käyttää (alkalinen pepnada).

QA

Jokaisesta valmistetusta erästä on inkuboitava kaksi putkea ilman inokulointia 24 tunnin ajan aerobioosissa 37 ° C: ssa. Aika on ohi, sameutta tai värinmuutosta ei tule havaita.

Tunnetut ohjaimet voidaan käyttää myös sen tehokkuuden arviointiin:

Tätä varten voit käyttää seuraavia bakteerikannoja: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella Enteritidis ATCC 13076.

Kaikissa tapauksissa odotetaan tyydyttävää mikrobikehitystä, jota havaitaan ympäristön sameus.

Rajoitukset

-Dehydratoitu väliaine on erittäin hygroskooppinen, joten se on pidettävä poissa kosteudesta.

-Elatusainetta ei tule käyttää, jos havaitaan minkäänlaista heikkenemistä.

-Dehydratoitu viljelyalusta tulisi pitää välillä 10 - 35 ° C

-Valmistettu väliaine on pidettävä jäähdytettynä (2-8 ° C).

Viitteet

1. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B ja Velázquez tai. Tekniikat elintarvikkeiden mikrobiologiseen analyysiin. 2009, 2. painos. Kemian tiedekunta, UNAM. Meksiko. Kemian tiedekunnan käsikirjan ja asiakirjojen järjestelmänvalvojan (amyd) versio UNAM 1. Saatavana osoitteessa: http: // depa.Fquim.Yksinäinen.MX
2. Britannia Laboratories. Puskuroitu Peptonada -vesi. 2015. Saatavana osoitteessa: Britanialab.com
3. Neogen -laboratoriot. Peptonada -vesi. Saatavana osoitteessa: FoodSefety.Neogen.com
4. Britannia Laboratories. Peptonada -vesi. 2015. Saatavana osoitteessa: Britanialab.com
5. Merck Laboratories. Peptonada puskuroitu vesi. Saatavana osoitteessa: Merckmillipore.com
6. Conda pronadisa -laboratoriot. Emäksinen pepnada -vesi. Saatavana osoitteessa: Condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott -mikrobiologinen diagnoosi. 12 Ed. Pan -American toimitus.-Lla. Argentiina.