Lactosado -liemi

Imetetyt liemet. Lähde: Kuva, jonka on ottanut MSC -kirjoittaja. Marielsa gil

Mikä on laktosado -liemi?

Hän Lactosado -liemi Se on nestemäinen viljelmä, ei selektiivinen, pääasiassa edeltävän rikastumisen keinona kantojen eristämisessä Salmonella, jalostettuihin elintarvikkeisiin, maitotuotteisiin tai veteen tehdystä mikrobiologisesta analyysistä. Tätä suosittelee elintarvikkeiden mikrobiologisia eritelmiä käsittelevä kansainvälinen komissio (ICMPF).

Elatusaine sisältää entsymaattisen gelatiinin, lihan ja laktoosiuutteen, bakteerien kasvulle tarvittavat aineet. Lisäksi laktoosi on käyttävä hiilihydraatti, joten jotkut koliumit kykenevät avaamaan sen kaasuntuotannolla.

Siksi American Public Health Association (APHA) suosittelee laktosadoliemiä oletettua tutkimusta kokonais- ja fekaalisten koliformisten bakteerien tutkimuksessa. Sitä kuvataan erinomaisena vaihtoehtona korvaamaan Lauril -sulfaatti -triptoosilieme todennäköisimmän lukumäärän (NMP) vakiotekniikassa, jota käytetään elintarvikkeiden näytteiden, maidon ja pintavesien, maanalaisten, virkistys-, kotimaisten ja teollisuusjäännösten mikrobiologiseen analyysiin.

Perusta

Joidenkin näytteiden mikrobiologista analyysiä varten edeltävän rikastumisen läpäisy on välttämätöntä spesifisen mikro-organismin palauttamiseksi, joka voi olla erittäin pienessä määrässä tai ei-suosituissa olosuhteissa, jotka rikkovat tai minimoivat sen elinkelpoisuutta. 

Näin on kuivien ja jalostettujen elintarvikkeiden tapaus, mahdollisesti saastunut Salmonellas Sp. Näissä tapauksissa, jos bakteereja on läsnä, ne ovat kärsineet fysikaalista ja kemiallista väärinkäyttöä tuotteiden tuotantoprosessin aikana.

Sillä tavalla, että mikro -organismit ovat alttiina haitallisille tekijöille, kuten kuivuminen, estäville tai myrkyllisille tuotteille altistuminen ja muiden bakteerien esiintymisen aiheuttama päällekkäisyys suuremmassa määrässä, mm.

Tässä mielessä laktosadoliemellä on mikro -organismin vaurioituneiden rakenteiden korjausvaikutus, mikä aiheuttaa sen palautumisen ja lisääntymisen siten, että se voidaan havaita.

Samoin Lactosadod. Lisäksi maitoliemen ravitsemuksellinen koostumus on strateginen suosimaan Salmonella SP muiden mikro -organismien yläpuolella.

Voi palvella sinua: paleobiologia: historia, erikoisuudet, löytöt

Lopullista tunnistamista varten sen on oltava subkulttuurista muihin lopullisiin kulttuureihin.

Toisaalta väliaineen koostumus mahdollistaa myös laktoosin käyvien mikro -organismien havaitsemisen, jotka tuottavat kaasua.

Valmistautuminen

Litran laktoosiliemin valmistelemiseksi 13 grammaa kuivuneesta väliaineesta on punnittava ja liuotettava 1.000 ml tislattua vettä.

Auttaaksesi väliaineen liukenemista veteen, voit lämmittää liuosta hiukan, mutta ei liikaa.

Kun liuos on valmistettu homogeenisesta, liuos valmistetaan seuraavasti: Jos liemeä käytetään koliformien etsimiseen, valmistetaan isku testiputkilla, jolle otetaan käyttöön Durham -käymisputki alaspäin.

Durhamin putki on erittäin tärkeä yksityiskohta, koska se sallii kaasun muodostumisen, suuren arvon tiedot koliformien etsinnässä.

Valmistettu putket, 10 ml Lactosado -liemiä, on annettu niihin, määrän, jonka on oltava riittävä kattamaan koko Durham -putki.

Jos laktosado-liemiä käytetään pre-enrique-liemenä, ei ole välttämätöntä sijoittaa Durham-käymisputkea. Tässä tapauksessa vaaditaan enemmän keskipitkää (225 ml), joka tarjoillaan 500 ml: n purkkeissa, leveä suu ja lämpöresistentillä langanpeitteellä.

Myöhemmin putket tai pullot viedään autoklaavaan 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan.

Väliaineen on oltava lopullisessa pH: ssa.9 ± 0.2 - 25 ° C.

Liemit tallennetaan jääkaapissa, kunnes se käytetään. Ennen kuin ne käytetään, niiden on oltava karkaisu huoneenlämpötilassa.

Toisaalta laktosadolieme voidaan valmistaa myös kaksoispitoisuudessa.

Voi palvella sinua: Herpetologia: Historia, kokoelmat, herpetologi -toiminta

Jotkut laboratoriot lisäävät bromia. Tässä tapauksessa liemi ottaa violetin värin ja jos käyminen muuttuu keltaiseksi.

Sovellukset

Mikrobiologialaboratorioissa laktosadolieme käytetään laajasti, koska se on suhteellisen taloudellinen väline, joka tarjoaa luotettavia ja nopeita tuloksia (24-48 tuntia).

Sitä voidaan käyttää veden ja ruoan kokonais- ja fekaalisten koliformien analysointiin tai pre-enrique-liemeksi Salmonella.

Edeltää

Ennakkotutkimus on askel ennen näytteen rikastumista, mikä parantaa huomattavasti sukupuolibakteerien palautumista Salmonella Jalostetuissa elintarvikkeissa.

Tätä varten kiinteän ruoan (25 gramman) tai nesteen (25 ml) näyte kylvetään 225 ml: aan Lactosado -liemiä, inkuboitua 24 - 48 tuntia. Myöhemmin se on subkulttuurinen väliaineessa, joka on rikastettu Selenito-lieminä Cistina tai Tetrationato-liemi. Siirry sitten valikoivaan media XLD: hen ja SS: hen.

Kokonais- ja ulosteen koliformisianalyysi

Se on erinomainen väliaine fekaalisen saastumisen indikaattorina.

Siksi Lactosadod.

Näytteille, joissa epäillään suurta määrää koliformeja, on inokuloitu pienempi määrä (1 ml), kun taas näytteille, joissa epäillään vähemmän koliformeja, näytteenottotilavuutta inokuloidaan enemmän (10 ml) (10 ml) (10 ml).

Analyysiä varten 10 tehdään^-1, 10^-2, 10^-3, 3-5 putken akun muodostaminen jokaiselle käytetylle pitoisuudelle.

Jokaisesta laimennuksesta sama tilavuus kylvötään laktosado -liemeihin.

Putkia inkubidaan 24 tuntia. Negatiivisia liemejä inkubidaan 24 tuntia enemmän.

Se voi palvella sinua: Perun meren eläimistö ja kasvisto

Tulosten tulkinta tehdään havaitsemalla kaksi ominaisuutta: ensimmäinen on sameuden esiintyminen tai puuttuminen, ja koska tämä väliaine ei sisällä pH -indikaattoria, värinmuutosta ei tapahdu.

Toinen on kaasuntuotanto. Kaasu näkyy helposti Durham -putkessa, yhden tai useamman ilmakuplan esiintymisen perusteella.

Sitä pidetään positiivisena, jos molempia ominaisuuksia havaitaan, ts. Syntää kaasuntuotannon kanssa. Positiiviset putket on hylättävä vahvistusväliaineissa (2% kirkas sappivihreä liemi ja EC -liemi).

Keskikokoisen laadunvalvonta

• Väliaineen valmistelussa on tärkeää olla unohtamatta sijoittaa Durhams -putkia, jos saman tarkoituksena on koliformien tutkimus.
• Älä ylikuumenna väliainetta ennen sterilointia.
• Jaa testiputkissa ennen sterilointia, älä koskaan.
• Älä käytä, jos väliaineessa on yli 3 kuukautta valmistettu.
• Älä käytä, jos väliaineen tavanomaisten ominaisuuksien muutoksia havaitaan.
• Kun valmistelet laktosado -liemeerää, sinun on todistettava saman kylvökantojen laatu Escherichia coli, Enterobacter Aerogenes, Citrobacter freundii ja Klebsiella pneumoniae. Ne kasvavat erittäin hyvin, kaasuntuotannolla (positiivinen kontrolli).
• Se voi sisältää myös Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Typhimurium jompikumpi Enterococcus faecalis, Ne kasvavat hyvin, mutta ilman kaasun tuotantoa (negatiivinen kontrolli).
• On vireillä, että kuivattujen väliaineen alkuperäinen väri on beige ja erittäin selkeän ja läpinäkyvän keltaisen valmistetun väliaineen väri. Jos värin tai ulkonäön muutosta havaitaan, se voi heikentyä.

Viitteet

1. Acevedo R., Caveriche, c., Castillo, M. Ympäristöbiologia ja mikrobiologia. Cartagenan yliopisto, Kolumbia.
2. Conda pronadisa -laboratoriot. Laktoosilieme kaksoispitoisuus (eurooppalainen lääke).