Korkean tehokkuuden nestekromatografia (HPLC) -säätiö, laitteet, tyypit

Se Tehokas nestekromatografia Se on instrumenttitekniikka, jota käytetään kemiallisessa analyysissä, jonka kanssa sen sallitaan erottaa seokset, puhdistaa ja kvantifioida sen komponentit sekä suorittaa muita tutkimuksia. Se tunnetaan HPLC -lyhenteellä, joka on johdettu englannista: Korkean suorituskyvyn nestekromatografia.

Siten, kuten nimensä huomauttaa, se toimii manipuloimalla nesteitä. Nämä koostuvat seoksesta, joka koostuu analyytistä tai kiinnostavasta näytteestä, ja yhdestä tai useammasta liuottimesta, jotka toimivat liikkuvana faasina; toisin sanoen se, joka vetää analyytin koko HPLC -tiimissä ja sarakkeessa.

HPLC -laite. Lähde: DQWYY [CC BY-SA 4.0 (https: // creativecommons.Org/lisenssit/by-SA/4.0)]

HPLC: tä leviää laajasti laatuanalyysilaboratorioista lukuisissa yrityksissä; kuten apteekkarit ja ruoka. Kyseisen analyytikon on valmistettava näyte, liikkuva faasi, tarkistettava lämpötila ja muut parametrit ja asetettava tiet pyörän tai karusellin sisälle siten, että laite suorittaa injektiot automaattisesti.

HPLC -laitteet on kytketty tietokoneeseen, jolla voidaan havaita generoituja kromatogrammeja, samoin kuin analyysin käynnistäminen, liikkuvan vaiheen virtausta, ohjelma eluution tyyppiä (isokraattinen tai gradientti) ja kytke ilmaisimet päälle (UV -Vis tai massaspektrofotometri).

[TOC]

Perusta

Toisin kuin tavanomainen nestekromatografia, kuten geelipiidioksidilla täytetty paperi tai pylväs, HPLC ei riipu painovoimasta siten, että nestekäät kostuttavat paikallaan olevaa vaihetta. Työskentele sen sijaan korkeiden puristuspumppujen kanssa, jotka kastelevat liikkuvan tai eluentin vaiheen pylvään läpi suuremmalla intensiteetillä.

Tällä tavalla se ei ole välttämätöntä.

Voi palvella sinua: Hiilidit: elementit, ominaisuudet ja käytöt

Mutta tämän tekniikan tehokkuus ei johdu yksinomaan tästä yksityiskohdasta, vaan myös pienistä täyttöpartikkeleista, jotka muodostavat paikallaan olevan vaiheen. Pienempi, sen kosketusalue liikkuvan vaiheen kanssa on suurempi, joten se on vuorovaikutuksessa analyytin kanssa ja sen molekyylit erotetaan enemmän.

Nämä kaksi ominaisuutta sekä se tosiasia. Erottelut ovat tehokkaampia, liikkuva faasi liikkuu paremmin paikallaan olevan vaiheen läpi ja kromatogrammit mahdollistavat jonkin analyysin havaitsemisen analyysissä.

Laitteet

Yksinkertaistettu kaavio HPLC -laitteen toiminnasta. Lähde: Gabriel Bolívar.

Yksinkertaistettu kaavio on esitetty yllä, kuinka HPLC -tiimi toimii. Liuottimet löytyvät niiden astioista, jotka on järjestetty letkuilla, jotta pumppu kuljettaa pienen määrän niitä laitteisiin; Meillä on mobiili vaihe.

Liikkuvan tai eluentin vaiheen on oltava ensin käytettävä, jotta kuplat eivät vaikuta analyyttimolekyylien erottamiseen, joka sekoitetaan liikkuvan vaiheen kanssa, kun laite on tehnyt injektiot.

Kromatografinen pylväs sijaitsee uunin sisällä, joka mahdollistaa lämpötilan säätämisen. Siten eri näytteissä on riittävä lämpötilat korkean suorituskyvyn erotusten saavuttamiseksi, samoin kuin laaja sarakkeiden luettelo ja täyteainetyyppi tai paikallaan olevat vaiheet erityistä analyysiä varten tietyssä analyysissä.

Liuenneen analyytin liikkuva faasi tulee pylvääseen, ja siitä ensin eluce molekyylit, jotka "tuntevat" vähemmän affiniteettia paikallaan olevaan vaiheeseen, kun taas silloin ne, jotka sen säilyttävät eniten, ovat eniten. Jokainen ELUIDA -molekyyli tuottaa kromatogrammissa visualisoidun signaalin, jossa havaitaan erillisten molekyylien retentio -aikoja.

Voi palvella sinua: nesteyttäminen: konsepti, kaasut, maaperät ja seisminen, siemen

Ja toisaalta liikkuvan vaiheen jälkeen, kun ilmaisimen läpäisy päättyy jätesäiliöön.

HPLC -tyypit

HPLC: tä on monia tyyppejä, mutta kaikista niistä merkittävimmät ovat seuraavat neljä.

Normaali vaihekromatografia

Normaali vaihekromatografia viittaa siihen, missä paikallaan oleva vaihe on polaarista luonnetta, kun taas apolaarinen matkapuhelin. Vaikka sitä kutsutaan normaaliksi, itse asiassa se on vähiten käytetty, se on käänteinen vaihe laajin ja tehokkain.

Käänteinen faasikromatografia

Koska olet käänteinen vaihe, nyt paikallaan oleva vaihe on apolaarinen ja polaarinen liikkuva faasi. Tämä on erityisen hyödyllistä biokemiallisessa analyysissä, koska monet biomolekyylit liukenevat paremmin veteen ja polaarisiin liuottimiin.

Ioninvaihtokromatografia

Tämän tyyppisessä kromatografiassa analyytti, positiivisella tai negatiivisella kuormalla, liikkuu sarakkeen läpi korvaavan talon ionit. Mitä suurempi kuorma, sitä suurempi sen retentio, joten sitä käytetään laajasti ionin siirtymämetallien erottamiseen.

Molekyylin syrjäytymiskromatografia

Tämä kromatografia, erottamisen sijaan, on vastuussa tuloksena olevan seoksen puhdistamisesta. Kuten nimestä voi päätellä, analyytti erotetaan enää riippuen siitä, kuinka liittyy paikallaan olevaan vaiheeseen, vaan sen molekyylin koon ja massojen mukaan.

Pienimmät molekyylit säilyvät enemmän kuin suuret molekyylit, koska jälkimmäiset eivät ole loukussa pylväiden polymeeristen täytteiden huokosten välillä.

Sovellukset

HPLC mahdollistaa sekä laadullisen että kvantitatiivisen analyysin. Laadullisen suhteen, kun verrataan kromatogrammin retentioaikoja tietyissä olosuhteissa, tietyn yhdisteen läsnäolo voidaan havaita. Tämä läsnäolo voi osoittaa sairauden, väärentämisen tai huumeiden käytön.

Voi palvella sinua: liuenneen aineen ja liuottimen

Siksi se on ryhmä, joka on osa diagnostisia laboratorioita. Samoin se on lääketeollisuudessa, koska se sallii tarkistaa tuotteen puhtauden ja samoin kuin sen liukenemisen liukeneminen mahalaukussa. Aloitusmateriaalit toimittavat myös HPLC: lle puhdistaakseen ne ja takaamaan paremman suorituskyvyn lääkkeen synteesissä.

HPLC: n avulla voit analysoida ja erottaa kompleksiset proteiiniseokset, aminohapot, hiilihydraatit, lipidit, porfyriinit, terpenoidit ja pohjimmiltaan se on erinomainen vaihtoehto työskennellä kasviuutteiden kanssa.

Ja lopuksi, molekyylin poissulkemiskromatografia antaa sinun valita erikokoisia polymeerejä, koska jotkut saattavat olla pienempiä tai suuria. Tällä tavoin saadaan tuotteet, joilla on alhainen tai korkea keskimääräinen molekyylimassa, tämä on määräävä tekijä sen ominaisuuksissa ja tulevissa sovelluksissa tai synteesissä.

Viitteet

1. Päivä, r., & Underwood, a. (1989). Kvantitatiivinen analyyttinen kemia. (Viides ed.-A. Pearson Prentice Hall.
2. Bussi Juan. (2007). Korkea tehokkuus nestekromatografia. [PDF]. Palautettu: Sormi.Edu.vai niin
3. Wikipedia. (2019). Korkean suorituskyvyn nestekromatografia. Haettu: vuonna.Wikipedia.org
4. Clark Jim. (2007). Korkean suorituskyvyn nestekromatografia. Talteenotettu: Chemguide.yhteistyö.Yhdistynyt kuningaskunta
5. Matthew Barkovich. (5. joulukuuta 2019). Korkean suorituskyvyn nestekromatografia. Kemian librettexts. Palautettu: Chem.Librettexts.org
6. G.P. Thomas. (15. huhtikuuta 2013). Korkean suorituskyvyn nestekromatografia (HPLC) - menetelmät, edut ja sovellukset. Toipunut: Azom.com