Puoli Stuart -säätiö, valmistelu ja käyttö

Hän Puoliksi stuart Se on puoliksi lempeä agar tai liemi ilman ravintoaineita, joita käytetään biologisten näytteiden kuljetukseen. Sen tarkoituksena on pitää näytteessä olevat kantot elinkelpoisina tietyn ajan, mutta lisäämättä mikrobipopulaatiota.

Sen ovat luoneet Moffet, Young ja Stuart vuonna 1948 ja myöhemmin Toshach ja Patsula muokkasivat sitä. Se koostuu natriumglysofosfaatista, natrium-tioglykoatista, kalsiumkloridista ja agar-iskuista. Jälkimmäinen on läsnä osittaisessa ja puuttuvassa väliaineessa nesteessä. Jotkut laboratoriot lisäävät metyleenisinistä.

Culturette Stuart -kuljetuksella. Lähde: Kirjoittaja: CDC/DR. Gilda Jones, kohteliaisuus: Kansanterveyden kuvakirjasto

Niitä käytetään yleensä, kun näytettä ei ole mahdollista kylvää heti. Tässä tapauksessa näyte asetetaan kuljetusvälineisiin, kun taas se siirretään laboratorioon, joka käsittelee satoa.

Tällä tavoin on taata, että läsnä olevat mikro -organismit pysyvät elossa, kunnes ne siirretään vastaavissa viljelyvälineissä.

Alun perin sen käytön tarkoituksena oli kuljettaa virtsaputken tai emättimen näytteet, joissa läsnäolo Neisseria gonorrhoeae. Myöhemmin he tajusivat, että heidän hyödyllisyytensä voisi olla laajempi.

Stuart -väliaine osoittautui erittäin tehokkaaksi säilyttäessään labiilia ja ärsyttäviä mikro -organismeja, kuten Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium dighteriae, Bordetella pertusis, muiden joukossa. Muiden ei -elävien mikro -organismien, kuten enterobakteerien, lisäksi.

Stuart -väliaine välttää periaatteessa näytteen kuivumisen, ylläpitää osmoottista tasapainoa ja pitää mikro -organismit ihanteelliseen pH: ksi. Toisaalta strategisesti tämä väliaine ei sisällä ravintoaineita, tämä estää mikro -organismeja moninkertaistumasta.

Markkinoilla on erityisiä näytteitä näytteiden kuljettamiselle, jotka sisältävät tätä tai muuta kuljetusvälineitä, nimeltään Culturette. Ne voidaan myös valmistaa laboratoriossa.

[TOC]

Perusta

Stuartin kuljetusvälineiden loppu on pitää näytteet lähinnä alkuperäistä tilaa, kunnes se on käsitelty.

Natriumglysofosfaatti ja kalsiumkloridi on puskurijärjestelmä, joka toimii ylläpitämällä pH: ta ja osmolaarisuutta.

Kun taas natrium -tioglykaatti toimii pelkistävänä aineena ja tämän sisältämisessä antaa sille puolijohdepohjan, ympäristön hapettumisen viivyttämiseksi. Lopuksi metyleenisininen on hapettumisindikaattori, ts. Se havaitsee hapen läsnäolon.

Voi palvella sinua: Glykosaminoglicanos: Ominaisuudet ja toiminnot

Puoli-kiinteä väliaine redox-indikaattorilla on ihanteellinen näytteiden kuljetukseen, joissa epäillään anaerobisten bakteerien läsnäoloa.

Kuljetusvälineiden ominaisuudet

Stuart -väliaine, kuten kaikki kuljetusvälineet, täyttää tietyt ominaisuudet, mukaan lukien:

-Pidä elinkelpoinen mikrobikannot läsnäolomaton.

-Se ei sisällä ravintoaineita; Sen yhdisteiden tavoitteena on pitää näytte hydratoituneina riittävissä pH: n ja osmolaarisuuden olosuhteissa.

-Estää joidenkin herkkien mikro -organismien, kuten Pneumococcus.

-Sen käyttö on väliaikaista, sitä ei pidä laajentaa liikaa.

Valmistautuminen

Puoli puoliksi kiinteä Stuart redox-indikaattorilla

Kotitekoinen valmistelu

Ainesosat

Natriumglysofosfaatti 10 gr

Natrium -tioglykoaatti 1.0 gr

Kalsiumkloridi 0.1 gr

Metyleenisininen 0.002 gr

Agar -agar 3 gr

Tislattua vettä 1 L

Sekoita komponentit ja lämmitä kokonaisliuokseen. Kaada putket tai erityiset escobillones. Ne viedään autoklaavaan ja steriloidaan 121 ºC: n lämpötilassa 15 minuutin ajan. Anna putkien jäähtyä pystysuunnassa (tacon muodossa). Huone huoneenlämpötilassa.

Valmistelu kaupallisella väliaineella

Punnitse 14,1 g väliainetta 1 litrassa tislattua vettä. Lämmitä usein sekoittaen sen kokonaisliukenemiseen saakka, voit antaa sen kiehua. Loput menettelystä, kuten jo on jo kuvattu.

Dehydratoitu väliaine on kerma ja valmistettu on oltava sinistä sen pinnalla. Tämä johtuu metyleenisinisen läsnäolosta.

Väliaineen pH on säädettävä arvoon 7,4 ± 0,2

Puoli modifioitu nestemäinen stuart (kotitekoinen valmistelu)

Ainesosat

Natriumglysofosfaatti 10 gr

Natrium -tioglykoaatti 1 gr

Kalsiumkloridi dihydratoitu 0,1 gr

1000 ml tislattua vettä

Siinä on samat ainesosat kuin puoliksi vakaana, mutta siinä ei ole agaria tai metyleenisinistä. Tässä tapauksessa komponentit ilman lämmitystä sekoitetaan ja 0,5 ml on jaettu 16 x 125 mm: n putkiin, jossa on lanka.

Se steriloi autoklaavessa 121 ° C: ssa 10 minuutin ajan. Näytettä varten.

Voi palvella sinua: Matemaattinen biologia: historia, opinto -objekti, sovellukset

Putket varastoidaan huoneenlämpötilassa.

Sovellukset

Kaupallisesti on erityisiä laitteita Culturette -nimisten näytteiden kuljettamiseen; Tämä laite on pitkänomainen ja ohut putki, joka tuo tamponin sisälle ja päähän, on segmentti, joka sisältää puolikerroksen tai nestemäisen Stuart -väliaineen.

Laite avautuu ja tampon kanssa ottaa näytteen. Sitten se viedään jälleen putkeen, kunnes tampon kärki asetetaan puoliksi kiinteän kuljetuksen väliaineeseen; Jotkut tuovat polyuretaanin sienen, joka on kyllästetty nestemäisellä Stuart -väliaineella, jonka kanssa näyte säilyy märkä.

Jos epäillään herkän mikro -organismien läsnäoloa, näytteessä on käytettävä puuvillan pelastustoimia.

Näytteet, jotka voidaan ottaa taisteluilla tai luuilla ja siirtää tässä väliaineessa.

Näytteen siirron aikana kuljetusvälineissä laboratorioon on vältettävä ympäristön ympäristö (erittäin kylmä tai erittäin lämpö) (erittäin kylmää tai erittäin lämpöä) (erittäin kylmää tai erittäin lämpöä). Ilmakehän paineen äkillisiä muutoksia tulisi myös välttää.

Aika, jolloin väliaine pystyy pitämään mikro -organismin elinkelpoisena, riippuu kyseisestä kannasta. Esimerkiksi Neisseriasin ja haemophiluksen suvun mikro -organismit voidaan pitää elinkelpoisena jopa 24 tunnin ajan, mutta Salmonella tai Shigella -kaltaiset kannat voivat kestää päiviä ja viikkoihin asti.

Jos arvioidaan, että näytteenkäsittely voi kestää yli 4 päivää, on edullista jäädyttää näyte -70 ° C: ssa.

Näytteen tunnistaminen kuljetusvälineinä

Valmistetulla kuljetusvälineellä tai kaupallisella kulttuurilla on oltava etiketti, johon seuraavat tiedot sijoitetaan:

Potilaan nimi ja sukunimi: Vältä näytteenottoa sekaannusta.

Tunnusnumero: On kätevää tuoda tilaus työhön.

Näytteen lähde: Auta bakteriologia asianmukaisten viljelyväliaineiden valintaan.

Voi palvella sinua: Kapselin värjäys: Perusta ja tekniikat

Lääkärin hoitaminen: Joskus se on välttämätöntä mahdollisille neuvotteluille.

Näytteen päivämäärä ja aika: Se on välttämätöntä näytteen hyväksymiselle tai hylkäämiselle näytteen ja laboratorion vastaanoton välisen ajan välillä.

Muut tiedot, jotka olisivat erittäin hyödyllisiä liitteelle, ovat:

Oletettu diagnoosi: Opas erityisten viljelymedian lisäämiseen diagnostisen epäilyn mukaan.

Antibioottihoito: On hyödyllistä kiinnittyä antibiogrammiin.

Kaikki nämä tiedot ovat elintärkeitä näytteen hyvän käsittelyn takaamiseksi.

QA

Stuart -väliaineen toiminnan arvioimiseksi voit inokuloida tunnettuja ja ylläpitämiä kantoja 25 ° C: ssa, kuten: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

Kaikissa tapauksissa sen odotetaan palauttavan kyseisen mikro -organismin, joka on säilytetty 24 tunnin ajan.

Toisaalta muut kannat, kuten: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ja Escherichia coli ATCC 11775.

Kaikissa tapauksissa odotetaan runsaasti jopa 96 tunnin ajan.

Rajoitukset

Jotkut tutkimukset varmistavat, että joidenkin koliformien avulla voidaan metaboloida glycefosfaattia, joka on metaboloida muun muassa gram -negatiivisten bakteerien joukossa, ja siksi moninkertaistaa tässä väliaineessa.

Tämä riski lisää, sitä enemmän näytteen käsittely viivästyy. Samoin Stuart -väliaineen näyttely korkeissa lämpötiloissa sen siirron aikana vaikuttaa tähän.

Viitteet

1. ”Kuljetuksen keskellä (mikrobiologia)." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 13. huhtikuuta 2018, 10:36 UTC. 1. huhtikuuta 2019. Saatavana: Tämä.Wikipedia.org
2. MicroKit Laboratories: Kulttuuriväliaine. Stuart -kuljetusväliaine. Saatavana: Saatavana: Culture Media.com
3. Rypäle. Stuart -kuljetusväliaine. Saatavana osoitteessa: Lablinsan.Cl
4. Tieteellinen MDM. Edut keskimääräisen mikrobiologisen kuljetuksen Stuartin kanssa. Saatavana osoitteessa: mdmcitify.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Saatavana osoitteessa: MetrixLab.MX
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott -mikrobiologinen diagnoosi. 12 Ed. Pan -American toimitus.-Lla. Argentiina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinen diagnoosi. 5. ed. Pan -American toimitus.-Lla. Argentiina.