Kulttuurivälineiden valmistelu

Kulttuuriväliaineen valmistelu on metodologia mikro -organismien kasvattamiseksi niiden tutkimiseksi

Mikä on kulttuurilaitteiden valmistelu?

Se Kulttuurivälineiden valmistelu Se on rutiininomainen menetelmä, jota käytetään laboratorioissa haluttujen mikro -organismien kasvuun. Viljelmäväliaineet ovat kiinteitä, nestemäisiä tai puoliksi kiinteitä valmisteita, joita kaikilla tarvittavilla ravintoaineilla on mikrobipopulaation kehittämistä.

Yleisesti.

Yleistä tai yleistä kulttuuria ei ole keinoja, koska sen koostumus vaihtelee kiinnostavan mikro -organismin tarpeista riippuen. Joitakin bakteereja voidaan kehittää missä tahansa viljelyalustassa, mutta toisilla on erityisvaatimuksia.

Mistä se koostuu?

Mikro -organismeja, kuten sieniä ja bakteereja, ei voida tutkia erikseen niiden mikroskooppisen koon takia. Siksi niitä on viljelty keinotekoisessa mediassa, jotka sallivat väestön merkittävän kasvun.

Esimerkiksi, jos haluamme tutkia bakteereja, meidän on tarjottava heille asianmukaiset olosuhteet, jotta ne voivat lisääntyä ja muodostaa pesäkkeen (joka voidaan havaita paljaalla silmällä).

Viljelyalustan valmistelu vaihtelee suuresti riippuen mikro -organismien tyypistä, jonka haluat kasvaa. Ennen sen valmistelua on tarpeen tietää työorganismin ravitsemukselliset tarpeet.

Alla kuvataan yleisimmät satoväliaineissa käytetyt komponentit yleisen kuvan sen valmistuksesta:

Agari

Sitä käytetään viljelykasveissa geeliytymisenä ja lisää, kun etsitään kiinteää tai puoliarvoista väliainetta. Ensimmäinen vakiintumisaine, jota käytettiin väliaineiden valmistuksessa. Hesse.

Bakteriologisen tyyppisen agarin pääkomponenttina on kompleksisten seurausten polysakkaridi, uutettu levästä. Tätä yhdistettä käytetään tavallisen ruoan sakeutusaineena, kuten jäätelö ja hillot.

Se on erittäin arvokas elementti mikrobiologiassa useista syistä. Pääasiassa, koska mikro -organismit eivät voi hajottaa sitä, nesteytyy lämpötilassa 100 ° C ja pysyy nestemäisessä tilassa, kunnes se saavuttaa 45 ° C: n tai vähemmän.

Jos haluat valmistaa kiinteän väliaineen, agarikonsentraation on oltava noin 1,5%, kun taas puolipiste on valmistettu 0,3: sta 0,5%: iin.

Nesteet

Patogeenisten organismien viljely tarvitsee kehon nesteitä, jotta ne voivat kehittyä niin kuin ne olisivat luonnollisessa ympäristössään.

Voi palvella sinua: proteesiryhmä

Tästä syystä lisätään täydellinen tai defibroitu veri. Neste uutetaan terveestä ja kun steriloitu eläin on lisätty viljelyalustaan.

Otteet

Ne saadaan erilaisista eläinosista (kuten liha tai maksa) tai vihannesista (siemenistä), ja ne prosessoidaan kiinteän konsentraatin saamiseksi pasta- tai pölymuodossa.

Yleisimmät ovat hiivan, mallasten ja lihan uutteet.

Peptonas

Nämä orgaaniset yhdisteet saadaan entsymaattisella tai eläin- tai kasvikudoksella. Tarkoituksena on lisätä aminohappojen rikas pitoisuus, jotka ovat proteiinien perusyksiköitä.

Iskunvaimentimet

"Puskurit" tai iskun absorboivat järjestelmät välttävät pH: n äkillisiä muutoksia ja auttavat ylläpitämään optimaalista aluetta, joka sietää organismia.

Useimmille organismeille voi kehittyä oikein 7, vaikka jotkut bakteerit mieluummin emäksistä väliainetta. On kuitenkin bakteereja, jotka kestävät pH: n vaihtelut 6 - 9: n arvojen välillä.

PH -herkissä lajeissa vaurioita ei tuoteta liiallisella vety- tai hydroksyyli -ionilla, vaan heikkojen happojen tai emäksien lisääntymisellä, jotka voivat tunkeutua soluun.

Samoin lisätään PH.

Tavoitteet

Päätavoite kulttuuriväliainetta valmistettaessa on lisätä kaikki tarvittavat komponentit, jotta eristyksestä haluaa organismin onnistuneen kehityksen. Tehokkaampien komponenttien ja ravinteiden yhdistelmä on tunnistettava halutut keinot.

Sekä valmistelu että keskisuuri varastointi ovat kriittisiä onnistuneen kasvun varmistamiseksi, koska nämä vaiheet riippuvat ympäristön koostumuksesta ja ravinteiden saatavuudesta.

On otettava huomioon, että mikro -organismien viljely on tehtävä, johon vaikuttaa useita viljelyympäristön ulkopuolisia tekijöitä, kuten vastaanotettu valon voimakkuus, lämpötila ja happamuustaso tai elatusapu.

Siksi jokainen näistä muuttujista on otettava huomioon ja tarkkailtava tiukasti.

Mediatyypit

Sen koostumuksen perusteella

Koostumuksensa perusteella on olemassa kolme päätyyppiä: luonnollinen tai empiirinen, puolisynteettinen ja synteettinen tai kemiallinen keino.

Luonnollinen ympäristö

Luonnollisessa mediassa tarkkaa koostumusta ei tunneta. Näitä ovat ainesosat, kuten maito, laimennettu veri, kasvimehut, uutteet ja lihan ja peptonien infuusiot.

Taloudellisista syistä lisätään matala -cost -komponentteja, kuten soijauutetta, seerumia, melassia jne.

Voi palvella sinua: Tuki: Ominaisuudet, toiminnot ja esimerkit

Puolisynteettinen väliaine

Sitä kutsutaan puolisynteettiseksi, jos saman koostumus tunnetaan osittain. Mikä tahansa agaria sisältävä väliaine on puolisynteettinen väliaine.

Niistä meillä on dekstroosiperuna, czapek-dox-agar, kaurahiutaleet, lihapeptoni kahva, muun muassa.

Synteettinen tai kemikaali määritelty väliaine

Tässä tapauksessa väliaineen koostumus - kuten hiilen, typen, rikin, fosforin ja minkä tahansa muun kasvutekijän määrän, on täysin tiedossa.

Se on erittäin hyödyllistä, jos haluat saada toistettavia tuloksia muille tutkijoille.

SO -nimikkeille "mikro -organismit, joilla on erityisiä kasvuvaatimuksia", sinun on lisättävä tarvittavat komponentit. Esimerkki tästä tyypistä on Lactobacillus.

Mikro -organismin tyypin perusteella

Samoin kulttuurivälialle on toinen luokittelu, joka perustuu siihen mikro -organismiin, joka voi kasvaa siinä.

Tämän periaatteen mukaisesti meillä on seuraavat: Yleiset keinot, rikastuminen, valikoivat ja erot. Jokainen on kuvattu alla:

Yleiset keinot

Nämä myöntävät monenlaisten mikro -organismien kehittymisen. Jos jokin organismi tarvitsee erityisiä olosuhteita kasvulle, se ei pysty kehittämään onnistuneesti tämän tyyppisissä satoissa.

Rikastusmedia

Rikastus tarkoittaa tietyntyyppisen mikro -organismin kasvua, mutta mitään ainetta ei ole lisätty muun tyyppisten mikrobien kasvattamisen estämiseksi.

Valikoivat keinot

He etsivät muun muassa mikro -organismin erityistä kasvua, kutsuvat sieniä, bakteereja, alkueläimiä. Tätä varten he estävät muiden kehitystä.

Tämän tavoitteen saavuttamiseksi voidaan lisätä kuolevaisten kemiallisia yhdisteitä laajalle mikro -organismeille ja vaarattomille kiinnostaville rungoille tai lisäämällä energialähteitä, jotka ovat vain asennettuja etsityllä mikrobilla.

Selektiivistä väliainetta käytetään, kun lääketieteellisiä näytteitä otetaan jonkin patogeenisen mikro -organismin viljelyyn. Tässä on tarpeen suosia taudinaiheuttajan kasvua ja estää potilaasta normaalin mikrobikalvon kehittymistä.

Esimerkiksi vismuttisulfite -agar ei salli gram -positiivisten bakteerien kasvua ja suurta määrää bakteereja, joita löytyy maha -suolikanavan ontelosta.

Siksi sitä käytetään gram -negatiivisten bakteerien viljelyyn, joka aiheuttaa lavantauti, Salmonella typhi, Fekaalinäytteissä.

Erotusvälineet

Tämä tyyppi käyttää jonkin verran kiinnostavan organismin diagnostista ominaisuutta (esimerkiksi aineenvaihdunnan erityispiirteet) pystyäkseen tunnistamaan ne toisia lajeja, jotka kasvavat samassa väliaineessa.

Se voi palvella sinua: Siirrot: Mitkä ovat, toiminnot, nimikkeistö, alaluokat

Sekä differentiaaliset mediat että selektiiviset keinot ovat erittäin hyödyllisiä kliinisen mikrobiologian ja kansanterveyden alueella, koska näiden tieteenalojen on havaittu patologioihin tai hygienian sairauksiin liittyvien spesifisten mikro -organismien läsnäolo.

Voit lisätä sadon indikaattoria aineita, jotka antavat erottuvan ominaisuuden halutulle siirtokunnalle. Esimerkiksi metyleenin (lyhennetty EMB) ja agar-macconkeyn (lyhennetty EMB) ja agar-macconkeyn keskipitkän agar-eosiini-hallinnan ja pH-indikaattorin.

Siten, kun pesäke kehittyy näissä mediassa kykyä käydä laktoosia ja tuottaa aldehydejä, niitä voidaan havaita erityisellä värillä.

Vaiheet kulttuurivälineen valmisteluun

Tällä hetkellä viljelyä voi ostaa lyofilisoidulla tavalla. Siksi valmistelua helpotetaan ja vain tuote pysyy.

Sisällön on oltava raskasta (ottaen huomioon lopullinen summa, jonka haluat valmistaa) ja liuennut tislattuun veteen kaikkien tuotekannusteiden jälkeen.

Nestemäisen väliaineen pito.

Kiinteän väliaineen jakamiseksi on tarpeen sulattaa se mikroaaltouunilla tai materiaalin lähettäminen vesihauteeseen. Keskipitkän pH on säädettävä.

Yleensä agaria käytetään koeputkissa tai Petri -levyissä. Jos agar jähmettyy kaltevassa asennossa, sopivalla kulmalla lopullisen päätelaitteen olevan diagonaali, se tunnetaan huiluna tai kallistettuina pico -putkina.

Kun agar jähmettyy täysin pystysuorassa asennossa, se annetaan "syvä" nimi "syvä".

Steriloinnin jälkeen media - autoklaavin avulla - he antoivat heidän jäähtyä. Niitä on manipuloitava mikro -organismeista vapaan ympäristössä, yleisin on työskennellä kevyemmällä sytytyksellä, joka varmistaa aseptisen ympäristön sen läheisyydessä.

Viitteet

1. Celis, j. JA. (2006). Solubiologia: laboratorion käsikirja (Vol. 2). Elsevier.
2. Hienosäätö. M., Bailey, W. R -., Paroni, e. J -., Hienoglod, s. M., & Scott, ja. G. (1991). Bailey Scott: Mikrobiologinen diagnoosi. Pan -American Medical.
3. Olivas, E. (2004). Mikrobiologia ja II ja parasitologiakäytäntökäsikirja. Ciudad Juarezin autonominen yliopisto.
4. Schlegel, H. G., & Zaborosch, C. (1993). Mikrobiologia. Cambridge University Press.
5. Tortora, G. J -., Funke, b. R -., & Tapaus, c. Lens. (2007). Johdanto mikrobiologiaan. Ed. Pan -American Medical.