Negatiivinen värjäys

Kuva influenssaviruksen negatiivisesta värjäyksestä a. Lähde: Katso kirjoittajan sivu, Wikimedia Commons

Mikä on negatiivinen värjäys?

Se negatiivinen värjäys Se on erityinen väritysmenetelmä, jolla korostetaan kapselin läsnäoloa joissain mikro -organismeissa - Streptococcus pneumoniae, klebsiella pneumoniae ja Cryptococcus neoformans-, kliinisistä näytteistä tai puhtaista viljelykasveista.

Suoraan käytetty suora näyte negatiivisen värjäyksen levittämiseen on aivo -selkäydinnestettä. Tämä tekniikka edustaa nopeaa vaihtoehtoa meningiitin oletetulle diagnoosille, etenkin Cryptococcus neoformans.

Tätä värjäystä voidaan levittää steriiliin ysköihin ja nesteisiin yleensä sekä nuorten puhtaiden viljelykasvien saatuihin kantoihin. Tekniikka käyttää nigrosiinia tai kiinalaista mustetta sen suorittamiseen, joten sovelletaan hyvin yksinkertainen ja taloudellinen menetelmä, joka tarjoaa tietoa suuresta diagnostisesta arvosta lyhyessä ajassa.

Tässä mielessä mikä tahansa laboratorio on kyky suorittaa tämä väri. Laboratoriossa on tietenkin oltava pätevä henkilöstö, joka kykenee tunnistamaan Cryptococcus neoformans eristetty tai kasvatus ja erota ne leukosyyteistä ja esineistä, joita näyte voi esiintyä.

Perusta

Nigrosiini ja kiinalainen muste toimivat samalla tavalla, joten kumpaakin aineita voidaan käyttää epäselvästi.

Tätä tekniikkaa kutsutaan negatiiviseksi värjäykseksi, koska se vaikuttaa muihin väritekniikoihin. Tässä, mikä on värjäytymistä, on rakenne, jota etsitään tai jonka haluat nähdä, ts. Mikro -organismit.

Siksi väri perustuu levityksen pohjan värjäytymiseen tummalla värillä. Tässä skenaariossa kapseloidut rakenteet korostavat kevyessä tai värittömässä.

Yleensä hiivat havaitaan, ympäröimä selkeä halo, joka vastaa kapselia. Tämä tapahtuu siksi, että kiinalainen muste ja nigrosiini eivät pysty tunkeutumaan polysakkaridiin, joka muodostaa elävien mikro -organismien kapselin.

Voi palvella sinua: butiarginen käyminen

On huomattava, että muut rakenteet, joita voi olla suorassa näytteessä, kuten leukosyytit tai punasolut.

Nyt, jos mikro -organismit ovat kuolleita, tinktuuri voi tunkeutua niihin, niin että tämä värjäys on hyödyllinen myös mikro -organismien elinkelpoisuuden arvioinnissa.

Tekniikka

Materiaalit

Nigrosiini

Nigrosiini on velkaa nimensä mustalle värille, joka sillä on. Se on synteettinen aine, joka saadaan orgaanisten yhdisteiden seoksen kuumentamisesta -nitrobenziinin, aniliinin ja aniliinihydrokloriitin -käyttämällä kyseisessä reaktiossa katalyytti (rauta tai kupari).

Kiinalainen muste

Kiinalainen muste on sisältö, jota pääasiassa aasialaiset kirjoittamista varten. Se on erittäin suosittu kiinalaisessa kulttuurissa.

Se saadaan kalmarin musteesta sekoitettuna jauhemaisen hiilen kanssa, pienten hartsikarussien palamisen tuote.

On myös mahdollista valmistaa se hiilivetyjen polttamisen noesta (kasviöljyt) yhdessä proteiinihyytelön kanssa, joka antaa sille sopivan konsistenssin hiilihiukkasten saostumisen välttämiseksi.

Näytteenoton tekniset tiedot

• Se ei vaadi paastoamista.
• Näytteen näyte, yskö tai steriili nesteen on sisällettävä vähintään 1 ml tilavuutta ja se on siirrettävä laboratorioon huoneenlämpötilassa.
• CSF -näytteet ja steriilit nesteet tulisi ottaa erikoistuneen lääkärin toimesta.
• Se voi olla myös puhdas sato epäilyttävästä kannasta, joka on kytketty edellä mainittuihin patogeeneihin.

Tekniikan suorittaminen suorilla näytteillä

• Näytteet on sentrifugoitava, sitten supernatantti hylätään ja sedimentti otetaan.
• Pisara sentrifugoitua materiaalia (sedimentti) ja tippa kiinalaista tai nigrosiinimustoa.
• Se on sekoitettava hyvin ja kansi kannen kansi, antamalla pudotus ulottua kuin hieno elokuva ylittämättä reunoja.
• Myöhemmin mikroskoopin valmistelu on asennettu.
• Jos valmistus on hyvin tumma, se voidaan laimentaa vedellä.

Voi palvella sinua: kemotropismi

Tekniikan toteuttaminen viljelykannoilla

• Hyvin pieni osa nuoresta sadosta otetaan kylvellä neulalla ja liukenee tippaan kiinalaisia ​​mustetta, joka on aiemmin asetettu puhtaalle liukumäelle.
• Kansi asetetaan päälle.
• Sitä havaitaan 10 -kertaisessa mikroskoopissa ja sitten 40x: ssä.

Voit myös liuottaa osan pesäkestä tislatussa vedessä, ja sieltä pudota ja sekoita se kiinalaisen musteen kanssa. Tällä tavoin valmistelu ei ole niin paksu, mikä mahdollistaa rakenteiden havainnon erikseen. Jos on agglomeraatioita, sitä ei havaita hyvin.

Toinen menetelmä on seuraava:

• Aseta pudotus jousituksen toiseen päähän.
• Aseta tippa nigrosiinia samaan päähän ja sekoita.
• Pidennä näyte toisen liukumäen avulla ikään kuin se tekisi hematologista leviämistä.
• Anna kuivua ja tarkkailla mikroskooppissa.

Mikroskoopin havainto

Ensin on keskityttävä 10x -kohteeseen, jotta heillä olisi laaja visio kentästä. Myöhemmin sinun on etsittävä, jos tilaa on selkeitä. Jos on, keskity 40x: llä nähdäksesi yksityiskohdat.

Edut

• Se on helppo suorittaa.
• Se on taloudellinen tekniikka.
• Tämä menetelmä ei vaadi, että levitys kiinnitetään lämmön tai kemikaalien kanssa, joten mikro -organismeja havaitaan ilman vääristymiä.
• Frescon valmistuksen ei tarvitse olla kuiva, joten sitä voidaan havaita heti, tuottaen tulokset nopeasti.

Haitta

• Asennettuna tuoreita valmisteita on tarkkailtava välittömästi. Jos niiden sallitaan kuivua, niitä ei enää ole mahdollista tarkkailla ja uutta.

Voi palvella sinua: itsekorjaus

Kiinalaisen musteen kudosten tinkä

Toinen toiminto, joka voi täyttää kiinalaisen musteen, on patologialaboratorioissa. Tätä sovelletaan näytteisiin kirurgisesti uutettuna tuumorin resektiomarginaalien merkitsemiseksi.

Merkitty kudos ruiskutetaan etikkahapolla. Tämä toimii petoksena ja estää mustetta pääsemästä ulos, kun kudos on rutiiniprosessointi biopsian valmistelua varten.

Menettely koostuu kankaan uimisesta alkoholissa ja ksyleenissä, ja sitten upottaa parafiinitahaan. Tämä merkintä ohjaa patologia tarkkailemalla kudosta, mikä osoittaa, missä kirurgisen resektion marginaali tai muu kiinnostava kohta on.

Viitteet

1. Nigrosiini. ES: stä palautettu.Wikipedia.org.
2. Forbes, b., Sahm, D., Weissfeld, a. Bailey & Scott -mikrobiologinen diagnoosi. Pan -American toimitus.-Lla.