Bilis agarc

Hän Bilis agulina Se on selektiivinen ja differentiaalinen kiinteä viljelyväliaine. Sitä käytetään diagnostisena testinä määrittääkseen tietyn mikro -organismin kyvyn kasvaa väliaineessa, joka sisältää sappia ja hajottaa myös glykosidi -sculiinin sculptiinissa ja glukoosissa.

Tätä diagnostista testiä käytetään erottamaan lajit ryhmään D (positiivinen veistos), jotka kuuluvat Streptococcus -ryhmistä, jotka reagoivat negatiivisesti tämän testin edessä.

Bilis Bilis -levy, Sembrove anterococcus -kannalla (positiivinen testi). Lähde: Ei konetta luettavissa olevaa kirjailijaa. Philippinjl oletettu (perustuu tekijänoikeusvaatimuksiin). [Julkinen verkkotunnus]

On huomattava, että jokin viridansiryhmän streptococcus voi hydrolysoitua.

Toisaalta keskipitkä sappi on hyödyllinen myös diagnoosissa Listeria monocytogenes tai laji Aerococcus sp, Koska nämä mikro -organismit ovat positiivisia veistoksia sappi.

Veistoksen sappi -agar koostuu peptonista, lihauudusta, härän sappista, veistoksesta, rautasitraatista, agarista ja tislatusta vedestä. Jotkut kaupalliset talot sisältävät natrium -azidan väliaineen koostumuksessa.

Elatusaine voidaan valmistaa laboratoriossa, jos kaikki yhdisteet ovat erikseen tai voit valmistaa kaupallisesta kuivuneesta ympäristöstä.

[TOC]

Perusta

Sculpton -väliaine sisältää peptoneja ja lihauutetta, molemmat yhdisteet tarjoavat tarvittavat ravitsemusaineet mikro -organismien kasvulle.

Se sisältää myös sculline; Tämä yhdiste on glucóside, joka muodostaa yksinkertaisen monosakkaridin (glukoosi) yhdistyessä yhdisteellä, jota kutsutaan 6.7-dihydroksymariiniksi tai hajautetuksi (agluconon), yhdessä asetaali- tai glukosidisidoksen kanssa.

Testi perustuu osoittamaan, pystyykö bakteerit hydrolyziin. Jos näin tapahtuu, veistos hajoaa scupiksi ja glukoosiksi. Sculetin reagoi keskellä olevan raudan kanssa, muodostaen tummanruskean, melkein mustan yhdisteen.

Voi palvella sinua: Thermoregulation: Fysiologia, mekanismit, tyypit ja muutokset

Tämä tarkoittaa, että rautasitraatti toimii reaktiokehittäjänä. Tämä ominaisuus tekee sappiagarin kuvanveistämisestä differentiaalista väliaineen.

Toisaalta sappi on estäjä, joka estää joidenkin mikro -organismien kasvun, siksi bakteerien ennen sculliinin on kyettävä kasvamaan sapen läsnäollessa. Siksi tätä väliainetta pidetään valikoivana.

Bakteerit, jotka voivat kehittyä tässä ympäristössä, ovat pääasiassa suolistossa eläviä.

Tässä mielessä jotkut kaupalliset talot lisäävät natrium -atsidiväliainetta lisäksi estämään gram -negatiivisten bacillien kasvua, mikä lisää väliaineen selektiivisyyttä Streptococcus -kasvulle.

Lopuksi agar antaa kiinteän konsistenssin ympäristölle ja vesi on yhdisteiden liuotin.

Valmistautuminen

Kotitekoinen sappiveistoksen valmistelu

Punnita:

5 g peptonia

3 g lihauutetta

40 g härkä sappia

1 g veistosta

0,5 g gr rautasitraattia

15 g agaria

1000 ml tislattua vettä

Natriumalatriin lisäämisen yhteydessä.

Liuota tislatun veden litran komponentit, kunnes yhdisteet liukenevat kokonaisuuteen. Jakele 5 ml testiputkissa, joissa on 16 x 125 mm langan kansi. Autoclavar 121 ° C: ssa, 15 kiloa 15 minuutin ajan.

Poista autoklaavista ja kallista putkia tuella, niin että agar jähmettyy laajaan huilun huipulle.

Pidä jääkaapissa käyttöön. Tuoda huoneenlämpötilaan ennen kylvöä.

Voi palvella sinua: maantieteellinen eristys

Voit myös valmistaa sappisappalevyjä; Tässä tapauksessa koko seos on autoklaava felolassa ja jakautuu myöhemmin Petri -steriileillä levyillä. He antoivat itsensä jähmettyä ja pysyä jääkaapissa.

Väliaineen pH: n on oltava 6.6 ± 0,2.

Bilis Agulinan valmistelu kaupallisesta mediasta

Punnitse insertin määrittämä määrä. Tämä voi vaihdella kaupallisesta talosta toiseen. Myöhemmin, jatka yhtä suurta kuin edellä selitetty menettely.

Keskipitkän pH: n on oltava 6,6 ± 0,2. Dehydratoidun väliaineen väri on vaalea beige ja valmistettu väliaine on tumma keltainen.

Puoliksi sappi kaupallinen veistos. Lähde: Kuva, jonka on ottanut MSC -kirjoittaja. Marielsa gil.

Sovellukset

Veistosta käytetään pääasiassa ryhmän D streptokokin erottamiseen (positiivinen veistos sappi) muusta Streptococcus -ryhmästä (negatiivinen veistos sappi).

Jos kasvutesti yhdistetään hypersaloidussa liemessä veistoksen sapen testiin, ryhmän D erityisen streptococcus -ryhmän tunnistaminen voidaan tunnistaa.

Tämä erityinen Streptococcus -ryhmä kuuluu mainitun genren ryhmään D ja kykenee hydrolysaamaan 6,5%natriumia), ominaisuuden, joka tekee eron.

Siksi streptococcus, joka hydrolysoi.

Kylvää

Inokuloi väliaine edullisesti 24 tunnin puhtaasta Todd-Hewitt-liemestä.

Lisää 2 tippaa keskipitkällä pinnalla pasteurpetillä ja ulottuu keskelle platinakahvalla.

Voi palvella sinua: Pelagiset: Ominaisuudet, kasvisto, eläimistö

Inkuboi 35 ° C: ssa 48 tunnin ajan, kun inkubaatioaika on toteutettu, sitä voidaan seurata, onko positiivinen reaktio. Jos reaktio on ajan lopussa negatiivinen, voidaan inkuboida 72 tunnin loppuun saakka.

Tulkinta

Positiivinen reaktio: Tummanruskean värin esiintyminen, melkein musta huilun huipulla (putkikokeen tapauksessa) tai agarin mustaneen pesäkkeiden ympärillä (levykokeen tapauksessa).

Negatiivinen reaktio: Keskipitkän mustata ei ole mustalla tai musta väri näyttää alle puolessa putkesta 72 tunnin inkubaation jälkeen. Toisaalta bakteerien kasvua keskellä ilman mustan värin esiintymistä tulisi pitää negatiivisena testinä.

QA

Arvioida väliaineen laatua, kanta Enterococcus faecalis ATCC 29212 positiivisena kontrollina ja Streptocococus -kanta, joka ei kuulu ryhmään D negatiivisena kontrollina.

Rajoitukset

-Väliaineet, jotka eivät sisällä natrium -atsidia, mahdollistavat gram -negatiivisten bakteerien kasvun. Jotkut heistä voivat pilata väliaineen.

- Jotkut kaupalliset talot lisäävät matalaa sappipitoisuutta (10%) ja tästä syystä jotkut streptococcus, jotka eivät kuulu ryhmään D.

Viitteet

1. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinen diagnoosi. 5. ed. Pan -American toimitus.-Lla. Argentiina.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott -mikrobiologinen diagnoosi. 12 Ed. Pan -American toimitus.-Lla. Argentiina.
3. Mac Faddin J. (2003). Biokemialliset testit kliinisen merkityksen bakteerien tunnistamiseksi. 3. ed. Pan -american toimitus. Buenos Aires. Argentiina.
4. Laboratorio. Britannia. Veistosta sappi Azida -agarin kanssa. 2015. Saatavana osoitteessa: Britanialab.com
5. "Bilis -veistosagar." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 22. elokuuta 17:30 UTC. 22. huhtikuuta 2019, 17:35. On.Wikipedia.org.
6. BD -laboratoriot. Sappi ekuliiniagar -viistot. 2015. Saatavana osoitteessa: BD.com
7. Neogen -laboratoriot. Bilis agulina. Saatavana osoitteessa: FoodSefety.Neogen.com