Suklaa -agari

Yersinia pestisbakteerit suklaa -agar -plakkilla. Lähde: Terveys- ja ihmispalvelujen osasto, Wikimedia Commons

Mikä on suklaa -agar?

Hän Suklaa -agari Se on keino vankalle, rikastetulle, ei -selektiiviselle ja ei -differentiaaliselle kulttuurille. Sitä käytetään lähinnä vaativien mikro -organismien eristämiseen ravitsemuksellisesta näkökulmasta, vaikka minkä tahansa tyyppiset bakteerit voivat kasvaa siinä.

Siksi sen hyödyllisyys kasvaa erityisesti näytteenotossa, jotka ovat normaalisti steriilejä, kuten CSF ja nivelneste. Vaikka se sisältyy myös väliaineisiin, jotka on valittu polymikrobisten näytteiden istuttamiseen, mutta näissä tapauksissa on tarpeen lisätä antibiootteja, jotka estävät samanaikaisia ​​kasvistoja.

Tällä väliaineella on ominainen ruskea väri, joka on hyvin samanlainen kuin suklaa, joten sen nimi. Valmistus on hyvin samanlainen kuin veriagarin, vain tässä tapauksessa veri on lämmitettävä siten, että punasolut rikkovat.

Sen valmistus, kuten Blood Agar, on erittäin herkkä, koska se on helposti saastuttava. Siksi monet laboratoriot mieluummin hankkivat tämän kaupallisten talojen jo valmistetut väliaineet, jotka takaavat niiden laadun.

Perusta

Se koostuu ravintoaineiden agar -pohjasta ja lämmitetystä verestä. Punasolujen hemolyysi tarjoaa väliaikaisen tekijän X (hemina) ja tekijä V (NAD), joka on välttämätöntä joidenkin mikro -organismien, kuten sukupuolen, kasvulle Haemophilus. Se on myös erittäin hyödyllinen eristää Neisserias sp.

Veriagarin tavoin erilaisia ​​mediaa voidaan käyttää perustoimistona tarpeesta riippuen. Käytettyjen tiedotusvälineiden joukossa ovat infuusio Cerebro Heart ja Crush -soijapavut, vaikka suositeltavimpia ovat Columbia Agar, Müeller Hinton, GC Agar ja Thayer Martin Agar.

Voi palvella sinua: Yksinkertainen diffuusio: Prosessi ja esimerkit

Jotkut suklaa -agar -muunnelmat sisältävät rikastetun lisäaineen, kaupallisesti saatavana, nimeltään Isovalex tai Polyvitex.

Nämä lisäravinteet sisältävät B -vitamiinia₁₂, L-glutamiini, adeniini, guaniinihydrokloridi, p-aminobentsoehappo, nikotiiniamidia adeniinidinukleotidi (NAD), tiamiinipyrofosfaatti, ferritnitraatti, tiamiinihydrokloridi, kysteiinihydrokloridi, L-Scenine ja Glucosi.

On tärkeää korostaa, että suklaa -agar on enemmän rikastettu kuin veriagar, mutta ei salli hemolyysikuvioita.

Sovellukset

• Suklaa -agar Columbia -agarin kanssa-. Lisäksi se on runsaasti vitamiineja, mineraaleja ja välttämättömiä aminohappoja. Tämä kuumennetun veren pohja on ihanteellinen eristää genren bakteerit Neisseria. Toisaalta, jos lisäys lisätään Brucella, Edellä mainitut mikro -organismit voidaan eristää. Tuloksia parannetaan hevosveren avulla.
• Suklaa -agar GC -pohja -agarilla (gonokokkiin): Sisältää peptonia, maissitärkkelystä, monobasic- ja dibasic -puskureita, natriumkloridia ja agaria. Suurimmassa osassa kaupallisesti valmistettuja suklaantuotantoesityksiä on tämän emäksen mukana, eivätkä ne sisällä lämmitettyä verta, vaan synteettistä hemina -seosta ja kasvutekijöiden kemiallista lisäystä, vitamiineja, mineraaleja, aminohappoja, tekijä V ja glukoosi.
• Suklaa -agar valmistettu Müeller Hinton Agarilla: Sitä käytetään suorittamaan antimikrobinen herkkyystesti vaativien mikro -organismien, kuten Streptococcus pneumoniae, Käyttämällä 5% lämmitettyä RAM -verta. Se palvelee myös ensisijaista eristämistä Neitsyt ja Haemophilus, mutta erityistapauksessa Haemophilus Hevosen veren käyttö on edullista, että se on runsaasti tekijä X ja V. Toisaalta, jos istutettava näyte on peräisin ei -stiilisestä alueelta, antibioottien lisäämistä suositellaan estämään alueen normaalia kasvistoa. Esimerkki: Hengitysnäytteille, joissa epäillään sukupuolibakteerien läsnäoloa Haemophilus Bacitrasiinia käytetään estämään Staphylococcus, Micrococcus, Streptococcus ja Neitsyt saprofyyttejä. 
• Suklaa -agar Thayer Martin Agarin kanssa: On erityistä eristää Neisseria gonorrhoeae. Sen on sisällettävä antibiootteja mukana olevan kasvistoa estämään. Karitsan verta käytetään.

Se voi palvella sinua: Zacatecasin kasvisto ja eläimistö: edustavampi laji

Valmistautuminen

Käytettävän perusagarin valmistelun indikaatiot on nähtävä. Yleensä he kuvaavat kuinka paljon sinun pitäisi painaa litran kulttuuriväliainetta. Laboratoriossa voit valmistaa tarvittavan tarkan määrän, joka voi olla enemmän tai vähemmän kuin litra.

Laskelmat

Kolme sääntöä on laskettava, kuinka paljon sinun on punnittava halutun määrän valmistelemiseksi. Esimerkki:

Jos 1 litraa on punnitaan 40 g ja laboratorio vaatii 800 ml, sanotaan:

1000 ml -40 gr

800 ml - x

Kaava on seuraava:

X = 32 g (määrä 800 ml huolimatta).

Punnita ja liuottaa

Tarvittava määrä punnitaan ja asetetaan felolaan veden kanssa.

Se kuumenee kohtalaisella lämmöllä ja sekoitetaan kevyesti kiertoliikkeillä, kunnes kuivunut väliaine liukenee kokonaan, antaen sen kiehua 1 minuutin ajan.

Steriloida

Fixola viedään autoklaavaan väliaineen steriloimiseksi 121 ° C: ssa 20 minuutin ajan.

Veren kokonais

Autoklaavasta poistuttaessa sen annetaan seistä, kunnes väliaineen lämpötila on noin 56 - 70 ° C veren sijoittamiseksi ja sekoittamiseksi, kunnes väliaine muuttuu ruskeaksi värilliseksi.

Jos lisäyksiä lisätään, tämä on aika tehdä niin. Myöhemmin sekoita ja tarjoile 20 ml jokaiselle steriilille Petri -levylle.

Koko toimenpide on suoritettava laminaarivirtauskellossa tai Bunsen -kevyemmän ympärillä. Anna seistä, kunnes ne jähmettyy ja säästävät käänteisesti jääkaapissa.

Toinen tapa valmistaa suklaa -agar käyttämättä verta

Perusväliaine valmistetaan edellä kuvatulla tavalla, kaupallisesti saadut dehydratoidut hemoglobiini ja autoklaavissa steriloitu.

Voi palvella sinua: hemoolinfa

Molempien liuosten sallitaan jäähtyä 50 ° C: ssa, lisäosa liitetään ja lisätään. Sekoita aseptiset olosuhteet ja palvele sitten Petri -steriileillä levyillä.

QA

On tärkeää, että veri sijoitetaan ilmoitettuun lämpötilaan, koska on ihanteellinen punasolujen lisarille ja samalla ylläpitää tekijää V, mikä on termeeniä.

Niiden ei pitäisi olla kuplia agarin pinnalla. Jokaisesta 100 levyn erästä yksi tai kaksi levyä on inkuboitava liesissä 37 ° C: ssa 24 tunnin ajan sen steriiliyden tarkistamiseksi.

Parempien tulosten saavuttamiseksi suklaa -agaria on käytettävä pian sen valmistuksen jälkeen.

Laboratoriossa olisi otettava bakteerikannan kontrolleja, jotta voidaan arvioida, joka on vasta valmistettu kliinisen tärkeiden tärkeimpien vaativien mikro -organismien kasvuun.

Viitteet

1. Garcia, P., Seinät, f., Fernández del Barrio, M. Käytännöllinen kliininen mikrobiologia. Cadizin yliopisto. UCA -julkaisupalvelu.
2. Suklaa -agari. Haettu jstk.Wikipedia.org.