Vogel-Johnson Agar Mikä on, perusta, valmistelu, käyttää

Hän Vogel-Johnson-agar Se on vankka, selektiivinen ja differentiaalinen viljelyväline, joka on erityisesti muotoiltu eristämään Staphylococcus aureus. Tämän väliaineen ovat luoneet Vogel ja Johnson vuonna 1960 Zebovitz, Evans ja Niven vuonna 1955 muotoilivat Telurito Glycina -agarin muokkaamisesta.

Muutos koostui ympäristössä läsnä olevan manitolin pitoisuuden lisäämisestä ja pH -indikaattorin sisällyttämisestä. Nykyinen kaava koostuu Tripteínasta, hiivauutetta, mannitolia, dipotsioniumfosfaatista, litiumkloridista, glysiinistä, fenolipunaisesta, agarista, 1% kaliumeluriittiluosta.

On huomattava, että on olemassa muita mediaa, jotka, kuten Vogel-Johnson-agar, ovat valikoivia eristämistä varten S. aureus, kuten suolainen mannitoliagar ja Baird Parker Agar. Tässä mielessä voitaisiin sanoa, että Vogelin perusta - Johnson suostuu on sekoitus suolaisen mannitoliagarin ja Baird Parker Agarin välillä.

Ensimmäisessä siirtokunnat S. aureus Ne erottuvat fermentolista. Toisaalta toisessa S. aureus Sille on ominaista vähentää Teluro Teluroon ja muodostaa harmaat pesäkkeet mustaksi. Molemmat ominaisuudet havaitaan Vogel-Johnson-agarissa.

Tämä väliaine, kuten sen vastineet, on hyödyllinen havaitsemiseksi Staphylococcus aureus Elintarvikkeiden näytteissä teollisuustuotteiden terveysvalvonta ja kliinisissä näytteissä.

Perusta

Ravinnepanos

Vogel - Johnson -väliaine sisältää Triptein- ja hiivauutetta; Molemmat aineet tarjoavat pitkäketjuisia aminohappoja, jotka toimivat hiili- ja typpilähteinä, jotka ovat välttämättömiä bakteerien kasvulle. Tässä väliaineessa kasvavat bakteerit vievät näiden aineiden ravintoaineet.

Se voi palvella sinua: Perun meren eläimistö ja kasvisto

Valikoiva voima

Vogel - Johnson Agar pystyy estämään gram -negatiivisten bakteerien ja jopa joidenkin positiivisten grammien kasvu. Inhibiittoriaineet ovat kaliumtelliitti, litiumkloridi ja glysiini.

Differentiaaliteho

Aineet, jotka tekevät tästä differentiaaliväliaineesta. Manitoli on hiilihydraatti, ja kun fermentoituja happoja tuotetaan, ja ne tekevät väliaineesta punaisesta keltaiseksi, mikä tapahtuu punaisen pH -pH -indikaattorin läsnäolon ansiosta.

Kun taas väritön teluriitti, kun se on pelkistetty metallivapaan teluroon, vie tummanharmaan värin.

Hän Staphylococcus aureus Ferments Mannitoli ja vähentää teluroa Teluroon. Siksi tyypilliset siirtokunnat S. aureus Tässä väliaineessa ne ovat harmaita tai mustia keltaisen väliaineen ympäröimänä.

Bakteerit, jotka kasvavat tässä väliaineessa ja eivät vähennä teluriittia tai mannolin käymistä, muodostavat läpinäkyviä pesäkkeitä, joita ympäröivät punainen väliaine, jopa voimakkaampi kuin alkuperäinen väri, johtuen väliaineen alkalinisoinnista peptonien avulla käyttämällä peptoneita.

Toisaalta bakteerit, jotka vähentävät teluriittia, mutta eivät fermente, manitoli kasvavat harmaina tai mustina pesäkkeinä, joita ympäröivät voimakas punainen väliaine.

Jos väliaine valmistettiin ilman kalium -telluriitin lisäämistä, pesäkkeet S. aureus Ne kehittyisivät keltaisiksi pesäkkeiksi, joita ympäröivät keltainen väliaine, kuten tapahtuu suolaisessa mannitoliagarissa.

Osmoottinen tasapaino ja jähminä

Dipotassiumfosfaatti ylläpitää väliaineen osmoottista tasapainoa ja säätää pH: n neutraalisuuteen 7.2. Kun taas agar antaa vankan konsistenssin viljelyalustalle.

Se voi palvella sinua: kasvisto ja eläimistö Meksikosta

Valmistautuminen

1% P/V -kalium -teluriittiliuos

Tätä ratkaisua ei sisälly dehydratoituun ympäristöön, koska sitä ei voida steriloida autoklaavessa. Tästä syystä se on valmistettu toisistaan ​​ja lisätään jo steriloidulle väliaineelle.

Jotkut kaupalliset talot myyvät 1%: n kalium -teluriittiratkaisun valmiina. Jos haluat valmistautua laboratoriossa, jatka seuraavasti:

Paina 1.0 g gr kalium -telluriittia ja mittaa 100 ml tislattua vettä. Liuota kaliuminsuhuri vettä ja täytä sitten veden määrä, kunnes se saavuttaa 100 ml. Steriloi liuos suodatusmenetelmällä.

Vogel-Johnson Agar -tuki

Punnitse 60 g dehydratoitua väliainetta ja liukene 1 litraan tislattua vettä. Seos lämmitetään kiehumiseen täydellisen liuoksen auttamiseksi. Liukenemisprosessin aikana väliaine sekoitetaan usein.

Steriloi autoklaavissa 15 kiloa painetta ja 121 ° C 15 minuutin ajan. Poista autoklaavista ja anna seistä, kunnes väliaine saavuttaa likimääräisen lämpötilan 45-50 ° C. Lisää 20 ml kaliumjäluriittiliuosta, joka on aikaisemmin valmistettu 1%: lla.

Sekoita ja kaada Petri -steriilit levyt. Anna kiinteyttää ja järjestää käänteisen levyn.

Valmistetun väliaineen lopullisen pH: n on oltava 7,2 ± 0,2.

Ennen näytteen kylvää sinun on odotettava levyn ottamista ympäristön lämpötilaan.

Valmistetun väliaineen väri on punainen.

Käyttää

Vaikka sitä voidaan käyttää eristämään S. aureus Minkä tahansa tyyppisissä näytteissä sitä käytetään enimmäkseen farmaseuttisten tuotteiden, kosmetiikan ja ruoan mikrobiologiseen analyysiin.

Se voi palvella sinua: SGLT (natrium-glukoosi kuljetusproteiinit)

On suositeltavaa, että siirrosto on tiheä. Kylvö voidaan tehdä kiinnittämällä platinakahva tai pinnalla Drigalski -lastalla.

Levyjä inkuboidaan 35-37 ° C: ssa 24-48 tuntia aerobioosissa.

QA

Voit suorittaa laadunvalvonnan Vogel-Johnson-ympäristöön voit käyttää seuraavia kantojen hallintaa:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Odotettu tulos on seuraava: S. aureus tyydyttävä kasvu mustilla pesäkkeillä, joita ympäröi keltainen väliaine. Puolesta S. epidermidis Säännöllinen kasvu läpikuultavilla tai mustilla pesäkkeillä, joita ympäröi punainen väliaine.

Lisäksi JA. koli On odotettavissa olevan täydellistä estoa ja Proteus mirabilis osittainen tai täydellinen esto; Jos se kasvaa, se tekee sen tuskin ja pesäkkeet ovat mustia punaisen puolivälin ympäröimänä.

Viitteet

1. BD -laboratoriot. VJ (Vogel ja Johnson Agar). Saatavana osoitteessa: BD.com
2. Britannia Laboratories. Vogel-Johnson-agar. Saatavana osoitteessa: Britanialab.com