Tripticaseína soijaliemi mikä on, perusta, valmistelu, käyttää

Hän Tripticaseína soijaliemi Se on nestemäinen viljelyväliaine, erittäin ravitseva eikä selektiivinen. Suuren monipuolisuutensa vuoksi se on yksi yleisimmin käytetyistä nestemäisistä viljelyväliaineista mikrobiologian laboratoriossa.

Se tunnetaan myös Triptic Soy Soy -nimellä Tryptikko olen Liemi tai CST). Sen käyttö on hyvin monipuolinen niiden koostumuksen takia. Se koostuu tripteiinistä, soijapapujen peptonista, natriumkloridista, dipotassuiumista ja glukoosifosfaatista.

Soija -soija tripticaseína kylvö. Lähde: Kuva, jonka on ottanut MSC -kirjoittaja. Marielsa gil.

Se kykenee lisääntymään kliinisesti tärkeitä patogeenisiä bakteereja, mukaan lukien ne, jotka vaativat ravitsemuksellisesta näkökulmasta ja anaerobisista bakteereista. Jotkut opportunistiset ja epäpuhtaus sienet voivat myös kehittyä tässä väliaineessa.

Korkean ravitsemusvoimansa vuoksi sillä on suuri herkkyys havaita mikrobien kontaminaatio, tästä syystä USDA: n eläinten ja kasvien terveydenhuollon tarkastuspalvelu valitsi sen rokotteiden mikrobiologiseen analyysiin varten.

Samoin tripticaseína -soijaliemi täyttää eri farmakoopolaisten (eurooppalainen EP, japanilainen JP ja Pohjois -Amerikan USP) vaatimukset teollisuusasteella olevien tuotteiden mikrobiologiseen tutkimukseen, kuten kosmeettisiin ja ruokiin.

Toisaalta on syytä mainita, että huolimatta siitä, että tämä väline on suuresta käytöstä, on suhteellisen taloudellinen, joten se on edullinen useimmille mikrobiologialaboratorioille. Lisäksi on erittäin helppo valmistaa.

Perusta

Tripteiini, peptoni ja glukoosi tarjoavat välttämättömiä ravitsemusominaisuuksia, jotta siitä tulisi ihanteellinen väliaine nopeaan mikrobikehitykseen.

Voi palvella sinua: Linnean -taksonomia elävistä olentoista

Noin 6–8 tuntia inkubaatiota voit jo arvostaa kasvua useimmissa mikro -organismeissa. On kuitenkin hitaita kasvukantoja, jotka voivat kestää päiviä kasvaa.

Natriumkloridi ja dipotaasinen fosfaatti toimivat vastaavasti osmoottisena ja pH -säätimen tasapainona. Kasvun esiintyminen käy ilmi sameuden esiintymisestä keskellä; Jos kasvua ei ole, väliaine pysyy läpikuultavana.

Vaaleanvärisensä vuoksi on mahdollista tarkkailla pigmenttien tuotantoa, kuten artikkelin alussa sijaitsevassa kuvassa esitetty, joka vastaa tuotettua pigmenttiä Pseudomonas aeruginosa. 

Valmistautuminen

-Tripticaseína soijaliemi

Triptych -soijaliemin valmistamiseksi 30 grammaa kuivattua kaupallista väliainetta on punnittava digitaaliseen tasapainoon. Sitten liukenee litrassa tislattua vettä, joka sisältyy Fixolaan.

Seos jätetään levossa 5 minuutin ajan ja vie myöhemmin lämmönlähteen keskipitkän liukenemisen auttamiseksi. Sitä on levoton usein kiehuessa minuutissa.

Kun se on liuennut. Voit käyttää putkia, joissa on puuvillakorkki tai Baquelita Tapas. Myöhemmin putket steriloidaan autoklaavessa 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan.

Keskipitkän pH: n on oltava 7,3 ± 0,2

On otettava huomioon, että kuivatun viljelmän väri on beige selkeä ja että se tulisi säilyttää välillä 10 - 35 ° C, kuivassa paikassa. Kun valmistettu liemi on kevyt keltainen ja se on säilytettävä jääkaapissa (2 - 8 ° C).

-Tripticaseína soijaliemi

Modifioitu tripticasein -soijaliemi voidaan valmistaa lisäämällä sappisuolat ja novobiocin JA. koli. Toinen vaihtoehto samaan tarkoitukseen on valmistaa soijapapu lieme, jota on täydennetty vankomysiinillä, kephiximellä ja teluritolla (2,5 ug/ml).

Voi palvella sinua: 25 esimerkkiä aseksuaalisesta lisääntymisestä

Toisaalta enemmän glukoosia (0,25%) voidaan lisätä tripticaseína -soijaliemiin, kun tavoitteena on stimuloida biokalvojen muodostumista.

Käyttää

Se on riittävän ravitsevaa, jotta vaaditaan vaativien tai ärsyttävien bakteerien, kuten Streptococcus pneumoniae, Streptococcus SP ja Brucella SP, Ei tarvitse täydentää verta tai seerumia.

Samoin jotkut sienet voivat kehittyä tässä liemessä, kuten Candida albicans -kompleksi, Aspergillus sp ja Histoplasma capsulatum.

Lisäksi tämä väliaine anaerobisissa olosuhteissa on ihanteellinen sukupuoleen kuuluvien bakteerien talteenottamiseksi, samoin kuin anaerobiset bakteerit, joita ei ole stifioitu kliinisellä merkityksellä.

Jos lisätään 6,5% natriumkloridin.

Tutkimustasolla se on ollut erittäin hyödyllistä erilaisissa protokollissa, etenkin biofilmien tai biofilmien tutkimuksessa, joka muodostaa bakteereja. Sitä käytetään myös 0,5 -prosenttisen Mac Farland -bakteerisuspension valmistukseen antibiogrammin suorittamiseksi Kirby- ja Bauer -menetelmällä.

Tässä tapauksessa otetaan 3–5 kolonia, jotka ovat samanlaisia ​​ja emulgoituja 4-5 ml: lla soija SOA Tripticaseinia. Sitten sitä inkubidaan 2-6 tuntia 35-37 ° C: ssa ja sopii myöhemmin haluttuun pitoisuuteen steriilistä suolaliuoksesta käyttämällä. Tripticasein -soija -heräämiä ei tule käyttää 18 - 24 tuntia inkubaatiota.

Kylvää

Näyte voidaan kylvää suoraan tai selektiivisistä keinoista otetut puhtaat pesäkkeet voidaan soveltaa. Inokulumin on oltava pieni, jotta väliainetta ei pilvistä ennen inkubointia.

Normaalisti sitä inkubidaan 37 ° C: ssa aerobioosissa 24 tunnin ajan, mutta nämä olosuhteet voivat vaihdella etsimän mikro -organismien mukaan riippuen. Sitä voidaan inkuboida myös anaerobioosin olosuhteissa 37 ° C: ssa useita päiviä tarvittaessa. Esimerkiksi vaatiessaan mikro -organismeja tai hidasta kasvua, sitä voidaan inkuboida jopa 7 päivän ajan.

Voi palvella sinua: Dextrose peruna -agar: Perusta, valmistelu ja käyttö

Farmaseuttisten aineiden mikrobiologisessa analyysissä - kuten rokotteet - protokollat ​​ovat tiukempia. Näissä tapauksissa lieme ilman kasvua ei suljeta pois, ennen kuin se täyttää 14 päivää jatkuvan inkubaation.

QA

Jokaisesta valmistetusta erästä 1 tai 2 putkea tulisi inkuboida sen steriiliyden osoittamiseksi. Täytyy pysyä ilman muutosta.

Voit myös kylvää tunnettuja kantoja arvioidaksesi käyttäytymistäsi. Käytettävien kantojen joukossa ovat:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 tai 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

Kaikissa tapauksissa kasvun on oltava tyydyttävä ilmakehän olosuhteissa ja riittävä lämpötila jokaiselle mikro -organismille.

Rajoitukset

-Glukoosin käyminen aiheuttaa elatusaineen pH: n laskeutumisen happotuotannolla. Tämä voi olla epäedullista joidenkin happamuuden eloisan mikro -organismien selviytymiselle.

-Sitä ei suositella kantojen ylläpitämiselle, koska happamuuden lisäksi bakteerit muutaman päivän kuluttua pakokaasujen ravintoaineista seurauksena, että myrkylliset ympäristöt tekevät siitä, että.

-Sinun on työskenneltävä huolehtimaan kaikista steriiliysprotokollista, koska liemet ovat helposti saastuttavia.

-Kun tripticasein -soijaliemit ovat valmistettu, sitä ei pidä yrittää siirtää lieme toiselle steriilille putkelle, koska tämäntyyppiset liikkeet ovat erittäin alttiita saastumiselle.

Viitteet

1. Britannian laboratorio. Tripteine ​​soijaliemi. Saatavana osoitteessa: Britanialab.com
2. MCD -laboratorio. Tripticaseína soijaliemi. Saatavana osoitteessa: Electronic Systems.com
3. Neogenin laboratorio.  Triptyykki soijaliemi. Saatavana osoitteessa: FoodSefety.Neogen.com