Sim -säätiö, valmistelu ja käyttö

Hän SIM -väline Se on puoliksi lempeä ja differentiaalinen agar, joka on erityisesti suunniteltu auttamaan joidenkin bakteerien tunnistamista, pääasiassa Enterobacteriaceae -perheestä. Se koostuu triiniinistä, peptonista, rautasulfaatista, ammoniumsulfaatista, natriumitiosulfaatista ja agarista.

Tämä väliaine mahdollistaa kolmen tärkeän testin suorittamisen: rikkivetytuotannon (H₂S), indolin ja liikkuvuuden muodostuminen, sieltä tulee lyhenne SIM. Suuren hyödyllisyytensä vuoksi sitä ei voida puuttua bakteriologian laboratoriosta.

-Lla. Keskimmäinen sim kaupallinen b. SIM H2S (-), indol (-) ja liikkuvuus (+) ja SIM H2S (+), indol (-), Motility (+) -testitesti. Lähde: a. Kirjailija MSC: n ottama kuva. Marielsa gil b. Mfloayza [cc by-Sa 3.0 (https: // creativecommons.Org/lisenssit/by-SA/3.0)]

Toisin kuin muut väliaineet, tämän on oltava puoliksi haja havaitaksesi liikkeen kapasiteetin, joka joillakin bakteereilla on. Tässä mielessä tämä testi toimii erittäin hyvin enterobakteereihin, mutta ei fermentöisissä negatiivisissa bakteereissa, joissa muita menetelmiä käytetään, kuten vireillä oleva pudotus.

SIM -väliaine mahdollistaa tiettyjen spesifisten ominaisuuksien erottamisen, jotka karakterisoivat joitain bakteereja suhteessa muihin. Esimerkiksi Escherichia coli erotetaan olemisesta h₂S (-), indol (+) ja liikkuvuus (+) Proteus mirabilis se on h₂S (+), indol (-), liikkuvuus (+).

[TOC]

Perusta

Se on viljelmä tarkoittaa, että sitä pidetään differentiaalisena, koska sen käyttö onnistuu erottamaan mikro -organismit, jotka kykenevät tuottamaan rikkivetyä niistä, jotka eivät; Se korostaa myös niitä, jotka muodostavat indolin tryptofaanista niistä, jotka eivät muodosta, ja lopulta erottaa liikkuvat bakteerit liikkumattomasta.

Virtalähde

Kuten mikä tahansa kulttuurin keino, siinä on elementtejä, jotka tarjoavat tarvittavat ravintoaineet, jotta ei -tarvittavat mikro -organismit voivat kehittyä. Näitä elementtejä edustavat Peptones ja Triptein.

Mikro -organismin kehitys ympäristössä on välttämätöntä tarkkailemaan tai puuttuen ominaisuuksien, joita tämä tarkoittaa, arviointia.

Rikkivetytuotanto

Lyhennyksen kirjain SIM viittaa rikkivetyjen tuotantoon (H₂S). Bakteerit, jotka kykenevät muodostamaan rikkivetyä, ottavat natriumsulfaatin.

Voi palvella sinua: Sisäinen erityinen kilpailu: Ominaisuudet, tyypit ja esimerkit

Kun H on muodostettu₂S -kaasut väritön-, tämä reagoi keskellä olevaa rautasuolaa, muodostaen rautasulfidin, selvästi näkyvä (musta sakka). Bakteerit, jotka eivät muodosta h₂S, jätä alkuperäinen väriväliaine (beige).

Mustan sakan läsnäolo voi estää liikkuvuuden tulkintaa. On kuitenkin tiedossa, että useimmat HT -tuottavat enterobakteerit₂S ovat positiivisia liikkuvuuksia, kuten salmonella, proteus ja citrobacter. Lisäksi musta sakka, joka kattaa melkein koko väliaineen, viittaa positiiviseen liikkuvuuteen.

Indolin muodostuminen

Lyhenneen SIM: n toinen kirjain on "I", joka edustaa indolin muodostumista.

Tässä mielessä TripTeine on ravintoaineiden lähteen lisäksi toisen perustavanlaatuisen toiminnon. Tämä peptoni sisältää runsaasti aminohappoa, jota kutsu.

Tämä entsyymi on vastuussa klivarista triptofaanin aminohappoon, minkä seurauksena indolin (väritön aine), pyruvihapon ja ammoniumin muodostuminen.

Siksi tämän reaktion osoittamiseksi se on välttämätöntä. Jompikumpi kahdesta reagoi indolin kanssa muodostaen punaisen fucsia-muotoisen renkaan agarin pinnalle. Jos fuksian värirengas näyttää, indolitesti tulkitaan positiiviseksi.

Bakteerit, joilla ei ole tätä entsyymiä, eivät muodosta rengasta ja tulkitaan negatiivisena indolitestinä.

On tärkeää huomata, että indolin todisteen on oltava viimeksi tulkittava, koska kun reagenssi on lisätty, väliaine estää liikkuvuuden visualisointia.

Liikkuvuus

Lopuksi sanan SIM -kirjain tarkoittaa liikkuvuutta. Motiliteetin arvioimiseksi tämä väliaine on strategisesti puoliksi kiinteä, koska tämä ominaisuus on välttämätöntä, onko bakteeriliikettä vai ei. Bakteerit, joilla on flagella, ovat ne, jotka antavat tämän positiivisen testin.

Voi palvella sinua: T -lymfosyytit: rakenne, toiminnot, tyypit, kypsyminen

Positiivinen testi käy ilmi, kun sameus havaitaan, sekä alkuperäisessä siirrossa että tämän ympärillä. Vaikka ei -mobile -bakteerit kehittyvät vain alkuperäisellä siirrosmatkalla.

Valmistautuminen

SIM -väline

Punnitse 30 g dehydratoitua väliainetta ja liukene litraan tislattua vettä. Seos jätetään levossa 5 minuutin ajan ja lämmitetään sitten kiehumiseen, usein sekoittuen sen täydelliseen liukenemiseen asti.

Jaka seos koeputkissa puuvillakansilla ja autoklavatti 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan. Poista autoklaaviputkien teline ja anna kiinteyttää pystysuorassa asennossa siten, että väliaine on tacon muodossa.

Suojelunsa vuoksi se tallennetaan jääkaapissa sen käyttöön, kunnes sen käyttöön. Valmistetun väliaineen on oltava lopullinen pH 7,3 ± 0,2.

Kun inokuloitiin väliainetta, tämän on oltava huoneenlämpötilassa. Mediumin väri on beige.

Kovacin reagenssi

Mittaa 150 ml amyyyli- tai isoamyyli- tai butyylialkoholia. (Käytä yhtä kolmesta mainitusta).

Liuota 10 g p-dimetyyliaminobentsaldehydi. Lisää sitten hitaasti 50 ml konsentroitua suolahappoa.

Käytettävä reagenssi on väritön tai selkeä keltainen. Se on pidettävä meripihkulajissa ja säilytettävä jääkaapissa. Älä käytä, jos otat tummanruskean värin; Se osoittaa, että se on vaurioitunut. Tämä reagenssi on edullinen, kun kyse on enterobakteereista.

Erlichin reagenssi

Punnitse 2 g: tä p-dimetyyliaminobentsaldehydiä ja liukenee 190 ml: een absoluuttista etyylialkoholia ja sekoittuu hitaasti 40 ml: n kanssa konsentroitua suolahappoa. Pidä Kovacin reagenssi samalla tavalla. Ehrlichin reagenssia käytetään enemmän ei -fermentointiin ja anaerobisiin bakteereihin.

Sovellukset

SIM -elatusainetta käytetään voimakkaasti bakteriologialaboratorioissa. Sillä on etuna, että enterobakteerien tunnistamisessa voidaan havaita kolme olennaista ominaisuutta.

Voi palvella sinua: etikkahävi: Ominaisuudet, sovellukset, esimerkit

Kylvää

Oikea tapa kylvää tätä väliainetta on neulan käyttö, jonka kanssa otetaan osa puhtaasta siirtokunnasta tutkittavaksi ja asetetaan väliaineen keskelle pystysuunnassa. Yksi harha on tehtävä. Punktion ei pitäisi saavuttaa putken pohjaa, oikea asia on peittää vain kaksi kolmatta osapuolta.

Ei ole suositeltavaa toistaa inokulumia, koska tämä voi kantaa vääriä tulkintoja positiivisesta liikkuvuudesta. Inokuloitu väliainetta inkubidaan aerobioosissa 37 ° C: ssa 24 tunnin ajan.

Kun aika on ohi, havaitaan, onko H: n tuotantoa vai ei₂S ja lue liikkuvuus. Lopuksi, indoli paljastetaan lisäämällä 3–4 tippaa Ehrlichin tai Kovacin reagenssia, sekoitettuna varovasti ja tulkittu.

Lähde: Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinen diagnoosi. 5. ed. Pan -American toimitus.-Lla. Argentiina.

QA

Steriiliötä hallinnassa yksi tai kaksi putkea ilman inokulointia 37 ° C: ssa 24 tunnissa inkuboidaan. Tämän ajan kuluttua kasvua tai värinmuutosta ei tapahdu.

Laadunvalvontana voit käyttää sertifioituja tunnetuja kantoja, kuten: Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter Aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella Sonnei ATCC 29930, Proteus vulgaris ATCC 13315.

Odotetut tulokset ovat: Escherichia coli H₂S negatiivinen, indoli ja positiivinen liikkuvuus, Enterobacter Aerogenes Vain positiivinen liikkuvuus, Salmonella typhimurium H₂S ja positiivinen liikkuvuus, negatiivisella indolilla. Proteus vulgaris Kaikki positiivinen, niin kauan kuin Klebsiella pneumoniae ja Shigella Sonnei Kaikki negatiivinen.

Rajoitukset

-Joitain kantoja Morganella morganii, Muiden kantojen joukossa voi tuottaa ruskehtavan pigmentin tässä väliaineessa melaniinin tuotannon vuoksi, tätä ei pidä sekoittaa rautasulfidisaostumiseen. Kokemattomilla ammattilaisilla tämä tilanne voi tuottaa vääriä positiivisia H -testin tulkinnassa₂S.

-Tiukat aerobiset bakteerit kasvavat vain putken pinnalla, mikä estää liikkuvuuden tulkintaa.

Viitteet

1. BD -laboratoriot. BBL SIM -MEDUM. 2008. Saatavana osoitteessa: BD.com
2. Neogen -laboratoriot. Simmedum. Saatavana osoitteessa: FoodSefety
3. Difco Francisco Soria Melguizo. Simmedum. 2009. Saatavana osoitteessa: http: // f-aria.On
4. Brizuela-laboratorio.  Keskimääräinen sim. Saatavilla: .Brizuela-labos.com
5. Britannia Laboratories. Keskimääräinen sim. 2015. Saatavana osoitteessa: StudyRes.Se on/doc
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinen diagnoosi. 5. ed. Pan -American toimitus.-Lla. Argentiina.