Capsula -säätiön ja tekniikoiden tincion

Se kapselin värjäys Se on differentiaalinen väritystekniikka, joka omistaa ominaisuuden korostaa polysakkaridirakennetta, joka ympäröi tiettyjä bakteereja ja hiivoja, nimeltään kapseli. Sitä käytetään kliinisissä laboratorioissa tiettyjen kapseloitujen mikro -organismien aiheuttamien patologioiden diagnosointiin.

Sitä käytetään myös laboratorioiden opettamisessa tämän morfologisen rakenteen osoittamiseksi terveystieteiden uran opiskelijoille, kuten: lääketiede, bioanalyysi, hoitotyö tai sytoteeknologia, muun muassa.

Klebsiella pneumoniae -suunta, joka on värjätty kapselin värjäyksellä. Intian mustemenetelmä safraniinin kanssa. Lähde: а.А.В [julkinen alue]

On olemassa useita yksinkertaisia ​​tekniikoita kapselin esiintymisen osoittamiseksi sen hallussa olevissa mikro -organismeissa, nämä ovat: negatiivinen värjäys, Anthonyn värjäys ja variantti, joka yhdistää kaksi edellistä.

Negatiivista värjäystä käytetään pääasiassa CSF -näytteissä, kun hiivan läsnäoloa epäillään Cryptococcus neoformans. Tämä hiiva on usein aivokalvontulehduksen syy.

Tämä tekniikka käyttää nigrosiinia tai kiinalaista mustetta ja perustuu kontrastin luomiseen valmisteen pohjan ja mikro -organismin läpäisemättömän kapselin välillä. Tausta on värjätty tummaksi ja kapseli on väritön. Tällä tavalla tämä rakenne on korostettu.

Anthony -tekniikan suhteen voidaan sanoa, että sitä käytetään enimmäkseen laboratorioiden opettamisessa polysakkaridirakenteen osoittamiseksi bakteereissa, kuten Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae ja Neisseria meningitidis.

Tämän tekniikan käyttö diagnostisiin tarkoituksiin on hyvin harvinaista, koska on olemassa muita rutiinitestejä, jotka sallivat näiden mikro -organismien tunnistamisen.

[TOC]

Perusta

Kapseli on polysakkaridin luonteen vahva rakenne. Tämä suojaa fagosytoosin mikro -organismeja, ja siksi se on vaikea tunkeutumisrakenne.

Siksi kapselien tahrat perustuvat kontrastiin. Väriaineet tahraa valmisteen pohjan, kun kapseli on väritön.

Siksi näiden tekniikoiden avulla kapseli on helposti tunnistettavissa. Jos mikro -organismissa ei ole kapselia, se ei ole erotettavissa tämän tyyppisellä värillä, koska kaikki värjätään samasta väristä.

Se voi palvella sinua: homologiset ja analogiset rakenteet (esimerkkien kanssa)

Kaikilla kapselin värityön tekniikoilla on sama perusta, vaikka ne käyttävät eri värejä ja menettelytapoja.

Tekniikatkapselin värjäytymiseen

-Anthony -värjäys

Anthonyn värjäys käyttää violetti lasia väriaineena. Tämä värjää bakteerirungon ja violettivärin taustan.

Toisaalta käytetään 20% kuparisulfaattia. Tämä toimii pesuliuoksena, toisin sanoen se poistaa valmisteen ylimääräisen violetin lasin, aiheuttaen kapselit selventämään, mutta ilman bakteerirunkoa tai taustaa menettäen värin.

Materiaalit

- Shortasolaattimaido.

- Kannettava lamina.

- 1% violetti lasi.

- 20% kuparisulfaatti.

- Optinen mikroskooppi.

- Upotusöljy.

Menettely

Tämä tekniikka koostuu:

1. Viljele mikro -organismia lesaattimaitossa 36 tunnin ajan.
2. Aseta tippa satoa esineen haltijan päähän ja aseta tippa violettia lasia, sekoita ja ulottuu toisen liukun päähän.
3. Ulkona eikä kiinnitä lämpöä.
4. Pese 20%kuparisulfaattiliuosta, päästä ulkona.
5. Tarkkaile mikroskooppia upotustavoitteella. Etsi laajennetun äärimmäisyyksiä.

On tärkeää olla käyttämättä lämpöä tai korjata tai kuivua, koska tämä vahingoittaa kapselia. Eikä pese vedellä.

Tulkinta

Lyhytmaito on erinomainen viljelyväliaine, koska se tarjoaa tarvittavat ravintoaineet mikro -organismeille näkyvän kapselin kehittämiseksi.

Toisaalta lakolentti maito muodostaa paksun ja kompaktin taustan, joka on värjätty violetiksi yhdessä bakteerirungon kanssa, mutta mikro -organismit ympäröivä kapseli on väritön. Siksi bakteerirungon ympärillä havaitaan kirkas halo.

Voi palvella sinua: tekijät, jotka vaikuttavat entsymaattiseen aktiivisuuteen Graafinen esitys Klebsiella pneumoniae -sarjan mikroskooppisesta havainnosta, joka on värjätty Anthonyn värjäyksellä. Lähde: Tekijän MSC: n valmistama. Marielsa gil.

Edut

Se on yksinkertainen tekniikka suoritettavaksi. Se ei vaadi kiinnitystä.

Samoin on huomattava, että muita viljelyvälineitä voidaan käyttää, mutta maidon väliaine on edullinen, koska sillä on etu, että se tarjoaa näkyvämpiä kapseleita.

Haitat

Se on hiukan työlämpi tekniikka kuin negatiivinen värjäys, ja visualisointiin se vaatii valmistuksen odottamisen kuivumista.

-Negatiivinen värjäys

Materiaalit

- Liukumäki.

- Kulttuuriväliaine, jolla on mikro -organismeja.

- Kiinalainen tai nigrosiinimuste.

- Optinen mikroskooppi.

- Fysiologinen suolaliuos.

Menettely

Aseta pisara fysiologista suolaliuosta kansiin ja liuota pieni osa mikrobikasvista. On tärkeää, että valmistelu ei ole kovin paksu. Aseta sitten tippa kiinalaista tai nigrosiinimusta ja sekoita.

Sitten valmiste asetetaan päällystettä ylittämättä nestettä. Se havaitaan mikroskoopissa, joka keskittyy ensin 10x -kohteeseen ja siirtyy sitten 40x: ään.

Tätä tekniikkaa voidaan käyttää myös suoraan CSF -näytteissä. Eli sen sijaan, että asetetaan tippa mikrobiviljelmä.

Edut

Se on yksinkertainen menetelmä suorittaa ja samalla taloudellinen. Se ei vaadi kiinnitystä tai valmistelun kuivaamista.

Haitat

Sillä on haitta, että se tulisi havaita mikroskoopissa ennen valmistelun kuivumista, koska jos tämä tapahtuu, mikro -organismit supistuvat, mikä vaikeuttaa visualisointia.

Toisaalta vääriä positiivisia asioita voi tapahtua, jos analyytikko on kokematon, koska leukosyytit yleensä sekoittavat hiivat.

Kiinalaisen tai nigrosiinitekniikan kapselin hiivojen havaitsemista olisi pidettävä oletettuna diagnoosina Cryptococcus neoformans Kunnes se osoitetaan viljelyllä.

Tämä johtuu siitä, että on olemassa muita hiivoja, jotka voivat olla aivokalvontulehduksen syy, eikä vain Cryptococcus neoformans, kuten suvun Candida ja Rhodotorula, samoin kuin muut Cryptococcus -lajit.

Voi palvella sinua: asetyylikoentsyymi

Tulkinta

Jos on kapselaattisia mikro -organismeja, havaitaan tumma tausta, nesteen kelluvat läpinäkyvät kappaleet korostaen kapselin läsnäoloa.

Cryptococcus -kapseli -neoformans värjätty kiinalaisella musteella. Lähde: Valokuvan luotto: Sisällöntoimittajat (t): CDC/DR. Leanor Haley [julkinen alue]

-Intialainen mustetekniikka

Tämä tekniikka voidaan tehdä myös nigrosiinin kanssa. Se on aiemmin selitettyjen tekniikoiden yhdistelmä. Tämä tekniikka käyttää Violet Crystal ja Intia tai nigrosiinimuste.

Bakteerirunko ottaa violetti lasin violetti väri. Jos bakteerilla on kapseli, sitä pidetään läpinäkyvänä halogeenina mikro -organismin ympärillä.

Violettikide voidaan korvata millä tahansa näistä väristä: safraniini, emäksinen fuchsiini tai metyleenin sininen.

Materiaalit

- Violetti lasi.

- Nigrosiini tai intialainen muste.

- Liukumäki.

- Mikroskooppi.

Menettely

- Viljellä mikro -organismia kulttuuriväliaineessa.

- Aseta tippa satoa liukuarkin päähän ja aseta tippa intialainen tai nigrosiinimuste, sekoita ja ulottuu toisen liukumäen päähän.

- Ilmakuiva eikä kiinnitä lämpöä.

- Peitä violetti lasiliuos 1 minuutissa, pese tislatulla vedellä, mutta erittäin herkästi (pehmeä suihkukone), päästä ulkona.

- Tarkkaile mikroskooppia upotustavoitteella. Etsi laajennetun äärimmäisyyksiä.

Tulkinta

Violetti bakteerirunko ja tumma tausta havaitaan. Kapseli, jos niitä on, on väritön bakteerien ympärillä.

Viitteet

1. Covadonga A, Silóniz M, Serrano S. Perusmikrobiologiatekniikat. Bakteerien havainto. Vähennä (biologia). Mikrobiologiasarja. 2010; 3 (5): 15-38. D -d
2. López-Jácome L, Hernández-Durán M, Colín-Castro C, Ortega-Peña S, Cerón-González G, Franco-Cendejas R. Perusvärjäys mikrobiologian laboratoriossa. Keskinkertainen.org. 2014; 3 (1): 10-18. Saatavana osoitteessa: medigrafinen.com
3. Gil m. Negatiivinen värjäys: perusta, tekniikka, edut ja haitat. Nostaja.com.
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott -mikrobiologinen diagnoosi. 12 Ed. Argentiina. Pan -American toimitus.-Lla
5. Tankeshwar a. Kapselin tahra: Periaate, menettely ja tulokset. 2019. Lääketieteellinen mikrobiologiaopas. Saatavana: MikrobeOnline.com