Agar XLD -säätiö, valmistelu ja käyttö

Hän XLD Agar o Acho Xilosa Lysine Desoxicicate on selektiivinen ja differentiaalinen kiinteä viljely enteropatogeeniselle eristykselle. Taylor suunnitteli XL -agar -kaavan (ksyloosi, lysiini) Shigella -suvun eristämisen parantamiseksi.

Hän totesi, että tämä genre inhiboitiin useimmissa enteropatogeenin eristyksessä tarkoitetuissa väliaineissa. Myöhemmin hänelle lisättiin natriumdeksolaatti, natriumtriosulfaatti ja rauta -amoninen sitraatti hänen selektiivisyytensä lisäämiseksi. Tämä kaava on osoittautunut hyödylliseksi sekä Shigellalle että Salmonella -eristykselle.

Erot Shigellan, Salmonella ja koliformien siirtokunnista Agar XLD: ssä. -Lla. Shigella sp, b. Salmonella sp, c. Koliformit. Lähteet: a. Kirjoittaja: CDC/ Amanda Moore, MT; Todd Parker, tohtori; Audra Marsh, kohteliaisuus: Kansanterveyskuvakirjasto B. https: // Lataa.Wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/salmonella_species_growing_on_xld_agar _-_ show_h2s_production _-_ yksityiskohta.Jpg c. Kirjoittaja: CDC/DR. J -. J -. Viljelijä, kohteliaisuus: Kansanterveyskuvakirjasto

XLD -agar koostuu hiivauutteesta, natriumista, ksyloosista, lysiinistä, laktoosista, sakkaroosista, natriumtriosulfaatista, rauta -ammoniumsitraatista, natriumkloridista, punaisesta fenolista ja agarista ja agarista. Useimmissa bakteriologialaboratorioissa agar XLD- ja SS -agar -duoa käytetään fekaalinäytteiden tutkimiseen Shigellan ja Salmonellan etsimiseksi.

Muut laboratoriot mieluummin Chromagar Salmonella- ja Agar XLD -yhdistelmät muun muassa käytettävissä olevat vaihtoehdot. Nämä duot voidaan valmistaa kaksinkertaisesti petrie -levyinä. Toisella puolella he asettavat Agar XLD: n ja vastakkaiselle puolelle valittu väliaine.

[TOC]

Perusta

-Ravitsemusvoima

XLD -agarissa on hiivauute, joka toimii ravinteiden lähteenä mikro -organismeihin, jotka kehittyvät tässä agarissa. Lisäksi hiilihydraattien läsnäolo (ksyloosi, sakkaroosi ja laktoosi) tarjoaa energiaa bakteereille, jotka voivat käydä niitä.

-Keskitason selektiivisyys

Estävänä aineena se esittelee natrium -asettelua; Tämä estää Gram -positiivisten bakteerien kasvun, mikä antaa keskipitkän selektiivisen luonteen.

-Differentiaaliteho

Tyypilliset Shigella -pesäkkeet

Kuten jo mainittiin, XLD -agar sisältää ksyloosia; Tätä hiilihydraattia käyvät kaikki bakteerit, jotka kasvavat tässä väliaineessa paitsi suvun Shigella.

Voi palvella sinua: Hardy-Weinbergin laki

Tämä on yksi ominaisuuksista, joita sen differentiaalinen hahmo tarjoaa, koska Shigellan pesäkkeet erottavat loput kehittämällä punaisia ​​pesäkkeitä, kun taas muut bakteerit tuottavat keltaisia ​​pesäkkeitä.

Salmonella -tyypilliset pesäkkeet

Sukupuoli Salmonella käy myös ksyloosia, joka tuottaa aluksi keltaisia ​​pesäkkeitä. Ksyloosihiilihydraatin tyhjentämisen jälkeen hyökkää lysiiniä sen entsyymi -lysiinin dekarboksylaasilla. Lysiini -dekarboksylointi tuottaa alkalista, jotka tekevät pesäkkeen värin ja alkuperäisen punaisen alkuperäiseen punaiseen.

Tämän käyttäytymisen suorittaa vain Salmonella, koska koliformit dekarboxyle. Tämä johtuu siitä, että koliformit myös fermentoivat laktoosia ja sakkaroosia; Siksi happojen tuotanto on erittäin korkea, jättäen keltaisen pesäkkeen näihin bakteereihin.

On huomattava, että sukupuolen salmonello ei käytä sakkaroosia eikä laktoosia.

H₂S

XLD -agar mahdollistaa myös H: n salmonellan tuottajien lajien havaitsemisen₂S; Tätä varten siinä on sulfidilähde, jota edustaa natriumtiosulfaatti ja reaktiokehittäjä, joka on rauta -ammoniumsitraatti.

Jälkimmäinen reagoi H: n kanssa₂S (väritön kaasu) ja muodostaa näkyvän mustan sakan liukenemattoman rautasulfaatin. Tässä mielessä Salmonellan pesäkkeiden ominaisuudet ovat punaisia ​​mustalla keskuksella.

On huomattava, että H: n reaktiolle₂S, emäksistä pH: ta tarvitaan. Siksi muut enterobakteerit, jotka muodostavat h₂He eivät voi tehdä sitä tai tehdä sitä huonosti tässä ympäristössä, koska niiden tuottaman korkea happamuus, kun ne käyvät läsnä olevia hiilihydraatteja, estävät tai estävät reaktiota.

-Natriumkloridi, agar ja fenoli punainen

Lopuksi natriumkloridi ylläpitää osmoottista tasapainoa; Agar on jähmettyvä aine ja fenolin punainen havaitsee pH: n muutokset kääntämällä pesäkkeiden väriä ja väliainetta.

Valmistautuminen

Punnitse 55 g XLD -kuivunut ja liukene 1 litraan vettä. Kuumenna ja ravista seosta, kunnes se saavuttaa kiehumispisteen. Älä ylikuumene, koska lämpö vahingoittaa väliainetta ja luo sakan, joka muuttaa tyypillisten pesäkkeiden morfologiaa.

Voi palvella sinua: proteoglykaania

Tätä väliainetta ei pidä autoklavoida. Liukenessasi sinun on siirryttävä kylpyhuoneeseen 50 ° C: sta. Kun jäähdytys tulee tarjoilla suoraan Petri -steriilillä levyillä. Ne voidaan hävittää yksinkertaisiksi levyiksi tai kaksoislevyiksi. Niiden annetaan jähmettyä ja pitää jääkaapissa käyttöön.

Kaltaa ennen käyttöä. Kuten ei -steriloitunut väliaine, on suositeltavaa valmistaa se lähellä käyttöpäivää.

Väliaineen lopullisen pH: n on oltava 7,4 ± 0,2. Valmistetun väri on oranssi punainen, läpikuultava, ilman saostumista.

Jos on lysiiniksyloosiagar (XL), natrium, natriumitiosulfaatti ja amoninen rautasitraatti voidaan lisätä. Tällä tavoin saadaan XLD -agar -kaava.

Sovellukset

XLD -agaria käytetään enteropatogeenien, lähinnä Shigella -suvun ja sukupuolen salmonellan toissijaisesti palauttamiseen. Se on hyödyllinen jakkaran, veden ja ruoanäytteiden arvioinnissa.

Näytteiden tyypit

Jakkara

Ulosteenäytteet voidaan kylvää suoraan XLD -agarissa, mikä tekee materiaalin hyvästä jakautumisesta eristettyjen pesäkkeiden saamiseksi.

Salmonellan palautumisen parantamiseksi XLD sopii salmonella -rikastumisvälineistä, jotka voidaan kylvää.

Ruoka

Ruoan tapauksessa rikastusliemiä voidaan käyttää salmonellaan ja Shigellaan. Salmonellaa varten voit käyttää muun muassa Selenito -liemekystiiniä, kirkkaanvihreä tetratedaattilieme.

Shigellan tapauksessa se voidaan rikastuttaa Shigella-liemellä, jossa on 0,5 µ/ml Novobiocinaa, inkuboitu 42 ° ± 1 ° C: ssa 16-20 tunnin ajan.

Vettä

Vesianalyysissä suositellaan membraaninsuodatustekniikkaa ja XLD -agarin käyttöä.

Kylvö- ja tunnistusolosuhteet

Kylvyä väliainetta inkuboidaan aerobioosissa 35 ° C: ssa 24 - 48 tuntia.

Se voi palvella sinua: Intian kasvisto ja eläimistö

Kunkin genren tyypilliset pesäkkeet havaitaan, epäilyttävät pesäkkeet on suoritettava biokemialliset testit tunnistamista varten.

QA

Keskipitkän laadunvalvonnan arvioimiseksi voidaan käyttää seuraavia bakteerikannoja: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella -aukio DSM 4224, Shigella flexneri ATCC 12022, Shigella Sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

Salmonella -suvulle on ominaista esitellä tässä keskipitkällä punaisella pesäkkeellä mustalla keskuksella tai täysin mustilla pesäkkeillä. Kun taas Shigella -suvussa pesäkkeiden on oltava punaisia, toisin sanoen väliaineen väri.

Siinä tapauksessa että Escherichia coli Sen odotetaan olevan täysin tai osittain estetty; Jos pesäkkeet kasvavat ovat keltaisia. Puolesta Proteus mirabilis Vahva kasvu odotetaan vaaleanpunaisten pesäkkeiden kanssa mustalla keskuksella tai ilman. Lopuksi Klebsiella -suvussa kasvaa keltaisina pesäkkeinä.

Viimeiset näkökohdat

XLD -agaria käytetään hyvin bakteriologialaboratorioissa sen korkean hyötysuhteen saavuttamiseksi Shigellan palauttamiseksi, ja sillä on myös hyvä Salmonella -sukupolvi.

Rall ja yhteistyökumppanit (2005) heidän työssään "Kolmen rikastusliemen ja viiden vankan väliaineen arviointi siipikarjassa" osoittivat, että 3 klassista todistetusta mediasta (kirkkaanvihreä agar, SS Agar ja Agar XLD), Agar XLD saatiin paras elvytysaste.

Salautumisprosentit olivat seuraavat: 13.8% kirkkaanvihreälle agarille, 27.6% SS: lle ja 34.5% XLD: lle. Sen ylitti sen vain kromogeeninen väliaine Agar Rambach 48%: n toipumisella ja kromagarilla 79: llä.3%.

Viitteet

1. Ruokalähetetyt sairaudet. Shigelloosi. Saatavana osoitteessa: Anmat.Hallitus.AR
2. ”Agar XLD." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 9. helmikuuta 2019, 11:46 UTC. 10. huhtikuuta 2019, 19:25 Wikipedia.org
3. BBL -laboratoriot. Chromagar Salmonella / BD XLD -agar (Bipacca).2013 saatavana: BD.com
4. Laboratorio. Neogen. XLD Agar. Saatavana osoitteessa: FoodSefety.Neogen
5. Francisco Soria Melguizon laboratorio. XLD Agar. Saatavana osoitteessa: http: // f-aria.Se on/tiedottaa
6. Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. Kolmen rikastusten ja viiden pinnoitusväliaineen arviointi salmonellan havaitsemiseksi siipikarjassa. Braz. J -. Mikrobioli.  2005; 36 (2): 147-150. Saatavana osoitteesta: Scielo.Br
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott -mikrobiologinen diagnoosi. 12 Ed. Pan -American toimitus.-Lla. Argentiina.