Mitkä ovat lentivirus?

Se Lentivirus, latinalaisesta lenti Mikä tarkoittaa hidasta, ne ovat viruksia, jotka vaativat pitkään, kuukausien ja vuosien välillä, alkuperäisestä tartunnasta taudin ulkonäköön. Nämä virukset kuuluvat genreen Lentivirus ja retrovirus (perhe Retroviridae), joilla on RNA -genomi, joka transkriptoidaan DNA: han käänteistranskriptaasin (TR) kautta.

Luonnollisesti lentivirus on läsnä kädellisissä, kavistelissa ja kissassa. Esimerkiksi kädellisissä on kaksi fylogeneettisesti sukulaisia: Apesfaciation immuunikatovirukset (SIV) ja ihmisen immuunikatovirukset (HIV). Molemmat ovat agentteja, jotka aiheuttavat hankitun immuunikato -oireyhtymän (AIDS).

Lähde: PhD Dre englanniksi Wikipedia [CC BY-SA 3.0 (https: // creativecommons.Org/lisenssit/by-SA/3.0)]

Lentivirusista saatuja lentivektoria on käytetty laajasti biologian, funktionaalisen genomiikan ja geenihoidon perustutkimukseen.

[TOC]

Retroviruksen elinkaaren vaiheet

Kaikkien retroviruksen elinkaari alkaa organismin yhdistämällä spesifiselle reseptorille solun pinnalla, mitä seuraa viruksen internalisaatio endosytoosilla.

Sykli jatkuu viruksen peittämisen ja virusnukleoproteiinikompleksin muodostumisen poistamisella, joka koostuu virusgenomista, joka liittyy virus- ja soluproteiineihin. Kompleksin koostumus muuttuu ajan myötä ja liittyy Invader -genomin TR: n muuntamiseen kaksois -DNA -potkurissa.

Viruksen genomin integrointi soluun riippuu virusgenomin kyvystä tunkeutua isäntä -ytimeen. VNC: n uudelleenorganisoinnilla on tärkeä tuonti tuonnissa ytimeen, vaikka tärkeillä soluproteiineilla, kuten Transportin-Sr2/TNPO3, Importin-alfa3 ja Importin7, vaikuttavat myös ytimeen.

Voi palvella sinua: elävien olentojen ominaisuudet

Virusproteiinit, kuten isäntäsolun integrointi ja transkriptiotekijät, kuten LedCF, ovat avainasemassa virusgenomin integroinnissa.

Tämä käyttää isäntäsolun koneita virusproteiinien transkriptioon ja transloimiseen ja virioneiden koottamiseen, vapauttamalla ne solunulkoisessa tilassa.

Lentivirusista lentivektoriin

Retroviruksen genomissa on kolme avointa lukemista (MLA) eri viruselementeille. Esimerkiksi capsidia ja matriisi (GEN haukkua), entsyymit (gen Napa) ja kääre (gen lähettää-A.

Virusvektorin rakentaminen koostuu joidenkin villiviruksen geenien, kuten virulenssiin liittyvien, eliminointiin. Tällä tavoin virusvektori voi tartuttaa eukaryoottisia soluja, retro-transkraafeja, integroida isäntä-eukaryot-solun genomiin ja ekspressoida siirtogeeniä (insertoitu terapeuttinen gen) aiheuttamatta sairautta.

Lentivektorin rakennusmenetelmä on siirtymäkauden transfektio. Se perustuu virusminigenoomien (kutsutaan rakenteisiin) käyttöön, jotka kuljettavat vain kiinnostavia geenejä. Siirtymäkauden transfektio koostuu rakenteiden riippumattomasta rakentamisesta.

Joillakin retroveektoreilla on vain pääelementit virushiukkasten kokoonpanoon, joita kutsutaan ei -toimimaisiksi retrovektoriksi. Niitä käytetään pakkaussolujen siirtämiseen.

Vektorit, joilla on siirtogeenin ekspressiokasetti.

Erillisten rakenteiden käytön tavoitteena on välttää rekombinaatiotapahtumia, jotka voisivat palauttaa villin fenotyypin.

Lentivektoritekniikka

Lentivektoritekniikalla on laaja käyttö perusbiologiassa ja translaatiotutkimuksissa Stable -siirtogeenien yliekspressioon, paikan ohjaamien geenien, pysyvien geenien vaimentamiseen, kantasolujen modifikaatioon, siirtogeenisten eläinten muodostumiseen ja pluripotenttisten solujen induktioon.

Voi palvella sinua: mikä on ortogeneesi?

Lentivektorit ovat helppo manipuloida ja tuottaa järjestelmiä. Ne ovat integroituja peruuttamattomia ja varmasti isäntägenomia. Tartuttaa soluja, jotka ovat jakautuneita tai eivät.

Ne osoittavat tropismia tiettyjen kankaiden suhteen, helpottaen terapiaa. Ne eivät ekspressoi virusproteiineja, joten heillä on alhainen immunogeenisyys. He voivat lähettää monimutkaisia ​​geneettisiä elementtejä.

Perustutkimuksessa HIV -pohjaisia ​​lentivektoreita on käytetty häiriöiden RNA -lähetysjärjestelminä (RNAI) spesifisen geenin toiminnan eliminoimiseksi, mikä mahdollistaa vuorovaikutuksen tutkimuksen eri muiden kanssa.

HIV: ltä saatu lentivektori

90-luvun alussa ensimmäiset lentivektorit rakennettiin HVI-1: stä, joka liittyy läheisesti simpanssin SIV: hen. HVI-1 vastaa aidsista maailmanlaajuisesti.

Ensimmäisellä lentivektorilla on merkittävä osa HIV -genomia. Sisältää geenejä Gal ja Napa, ja useita ylimääräisiä virusproteiineja. Tämä sukupolvi luotiin käyttämällä kahta rakennetta. Yksi niistä, joka ilmaisee laivaa, toimittaa pakkaustoiminnot. Toinen ilmaisee kaiken MLA: n, lukuun ottamatta merenkulkua.

Siirtovektori koostuu ekspressiokasetista, joka on merkitty kahden tyyppisillä pitkillä toistoilla (LTR) ja pakkaamiseen tarvittavat geenit.

Toisen sukupolven pakkausvektoreista puuttuu useimmat lisägeenit ja pidä Tat ja Rev. Nämä geenit poistettiin kolmannessa sukupolvessa ja toimitettiin neljäs rakenne.

Kolmannen sukupolven siirtovektorit koostuvat kahdesta pakkausrakenteesta. Yksi koodaa Gal ja Napa. Toinen enkoodi Rev. Kolmas rakenne koodaa kirjekuoren, joka on johdettu VSV-G. Se, joka koodaa kiinnostuksen geeniä, sisältää LTT LTT: n inaktivoidut sekvenssit rekombinaation välttämiseksi.

Voi palvella sinua: mikä on binomiaalinen nimikkeistö?

Viimeisessä tapauksessa transkription sääntelyelementit lisäävät siirtogeenien suorituskykyä.

Lentivektori saatu muista viruksista

HIV-2-virus liittyy läheisesti Magabey Gris SIV: hen (SIV_Tei) ja vastaa AIDS: stä Länsi -Afrikassa. Tästä viruksesta on saatu ensimmäisen ja toisen sukupolven vektorit.

Samanlainen kuin HVI-1, SIV: stä_Tei, IVF: n (kissan immuunikatovirus) EIAV: n (tarttuva anemiavirus) ja BIV: n (naudan immuunikatovirus (BIV) -vektorit kolmen sukupolven ajan on rakennettu. EIAV -pohjaiset vektorit on kehitetty kliiniseen käyttöön.

Kapriinin niveltulehdus-idefaliittiviruksesta (CAEV) on rakennettu ensimmäisen ja kolmannen sukupolven vektorit. Afrikan vihreän apinan IVR: stä ensimmäisen sukupolven vektorit on rakennettu.

Viitteet

1. Da Silva, f. H., Dalberto, t. P., Beyer Nardi, n. 2006. Retrovirusinfektion ulkopuolella: HIV kohtaa geeniterapian, genetiikan ja molekyylibiologian, 29, 367-379.
2. Durand, s., Cimarelli, a. 2011. Lentivirusvektorin sisäpuoli. Virukset, 3: 132-159.
3. Márai, J., Chuah, m. K -k -. Lens., Van den drissche, t. 2010. Viimeaikaiset edistykset lentivirusvektorin kehittämisessä ja sovelluksissa. Molekyyliterapia, 18: 477-490.
4. Milone, m.C., O'Doherty, u. 2018. Lentivirusvektorin kliininen käyttö. Leukemia, 32, 1529-1541.
5. Sakuma, t., Barry, m.-Lla., Ikeda, ja. 2012. Lentivirusvektorit: Perusta translaatioon. Biochemical Journal, 443, 603-618.